- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y66678
- 国产
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
29
- 英文名：
N,O-Diacetyltyramine
- CAS号：
14383-56-3
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
1 mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
化学性质:
N,O-Diacetyltyramine规格：1 mg
CAS：14383-56-3
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C12H15NO3
分子量：221.3
溶解度：Dichloromethane: soluble,DMSO: soluble,Ethanol: soluble,Methanol: soluble
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
N,O-Diacetyltyramine is a fungal metabolite that has been found in P. endophytica and has diverse biological activities.1 It is active against a panel of 13 bacteria (MICs = 8-128 μg/ml), as well as a panel of nine fungi (MICs = 64-256 μg/ml). N,O-Diacetyltyramine is cytotoxic to MDA-MB-231, HeLa, MCF-7, and OAW42 cancer cells when used at concentrations ranging from 10 to 5,000 nM. It is larvicidal against A. aegypti, A. albimanus, and C. quinquefasciatus mosquitos (LC50s = 724.8, 403.1, and 506.7 ppm, respectively).21.Mangamuri, U.K., Vijayalakshimi, M., Poda, S., et al.Bioactive metabolites produced by pseudonocardia endophytica VUK-10 from mangrove sediments: Isolation, chemical structure determination and bioactivityJ. Microbiol. Biotechnol.25(5)629-636(2015) 2.Quevedo, R., Nunez-Dallos, N., and Quinones, M.L.Larvicidal activity of single and macrocyclic tyrosine derivatives against three important vector mosquitoesRes. Chem. Intermed.41(8)5283-5292(2014)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | N,O-Diacetyltyramine | 产品货号 | CS-01Y66678 |
| 规格 | 1 mg | CAS号 | 14383-56-3 |
| 含量 | >70.00% | 分子式 | C12H15NO3 |
| 分子量 | 221.3 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
N,O-Diacetyltyramine规格：1 mg
CAS：14383-56-3
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C12H15NO3
分子量：221.3
溶解度：Dichloromethane: soluble,DMSO: soluble,Ethanol: soluble,Methanol: soluble
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
N,O-Diacetyltyramine is a fungal metabolite that has been found in P. endophytica and has diverse biological activities.1 It is active against a panel of 13 bacteria (MICs = 8-128 μg/ml), as well as a panel of nine fungi (MICs = 64-256 μg/ml). N,O-Diacetyltyramine is cytotoxic to MDA-MB-231, HeLa, MCF-7, and OAW42 cancer cells when used at concentrations ranging from 10 to 5,000 nM. It is larvicidal against A. aegypti, A. albimanus, and C. quinquefasciatus mosquitos (LC50s = 724.8, 403.1, and 506.7 ppm, respectively).21.Mangamuri, U.K., Vijayalakshimi, M., Poda, S., et al.Bioactive metabolites produced by pseudonocardia endophytica VUK-10 from mangrove sediments: Isolation, chemical structure determination and bioactivityJ. Microbiol. Biotechnol.25(5)629-636(2015) 2.Quevedo, R., Nunez-Dallos, N., and Quinones, M.L.Larvicidal activity of single and macrocyclic tyrosine derivatives against three important vector mosquitoesRes. Chem. Intermed.41(8)5283-5292(2014)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Recombnant Human 4-1BBL/TNFF9 proten ,N- Fc Tag | 样物质生长因子受体样蛋白1封闭多肽 |
| 驱动蛋白家族成员1B封闭多肽 | PRRG1 Antibody Blocking Peptide |
| 多巴胺受体D2封闭多肽 | OPG Antibody Blocking Peptide |
| 细胞角蛋白71封闭多肽 | ADORA2B Antibody Blocking Peptide |
| 高迁移率核小体结合蛋白1封闭多肽+O16445 | GDE1 Antibody Blocking Peptide |
| 转运蛋白G3封闭多肽 | PAQR8 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化活化复制因子2封闭多肽 | NR5A2 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化蛋白激酶AKT3封闭多肽 | 泛素连接酶ah1封闭多肽 |
| 跨膜γ羧基酸蛋白1封闭多肽 | phospho-AKT3 (Ser472) Antibody Blocking Peptide |
| 骨保护蛋白/护骨素封闭多肽 | phospho-ATF2 (Thr71) Antibody Blocking Peptide |
| 膜蛋白相互作用蛋白GDE1 (MIR16) 封闭多肽 | SLC37A1 Antibody Blocking Peptide |
| 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体封闭多肽 | HMGN1 Antibody Blocking Peptide |
| 孕激素受体β（MPRβ）封闭多肽 | N,O-DiacetyltyramineKRT71 Antibody Blocking Peptide |
| 成纤维细胞核受体Nr5a2封闭多肽 | DRD2 Antibody Blocking Peptide |
| OGFRL1 Antibody Blocking Peptide | KIF1B Antibody Blocking Peptide |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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