- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y75259
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
PTC124(Ataluren)
- CAS号：
775304-57-9
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
10mg 25mg 100mg 200mg
化学性质:
规格：10mg 25mg 100mg 200mg
CAS：775304-57-9
别名：PTC 124;PTC-124
化学名：3-[5-(2-fluorophenyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]benzoic acid
PTC124(Ataluren)分子式：C15H9FN2O3
分子量：284.24
溶解度：≥ 10.6mg/mL in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
PTC124 is a selective inhibitor of nonsense mutations with IC50 value of 0.1μM [1].Nonsense mutation is a point mutation in a sequence of DNA which promotes premature translational termination. Different from missense mutation, nonsense mutation means a single nucleotide is changed and results in the substitution of a different amino acid. It has been reported that some genetic disorders (thalassemia, DMD, CF, Hurler syndrome) are correlated with nonsense mutation [1, 2].PTC124 is a potent nonsense mutations inhibitor. When tested with human or mdx mice primary muscle cells expressing dystrophin nonsense alleles, 2-8 weeks treatment of PTC124 enhanced the production of dystrophin [1]. In iPSC-derived RPE cells with nonsense mutation c.519C>T (p.R120X), PTC124 treatment restored endogenous, full-length RP2 protein with near 20% [3]. When tested with COS7 cells carrying the nonsense mutation pDsRed-EGFPmtag-Y445X, EGFP transcript level was increased after treated by PTC124 in a dose-dependent manner [2].In mdx mice model, oral administration of PTC124 for 2-8 weeks rescued striated muscle function [1]. In a model of Cftr-/- mice expressing a human CFTR-G542X transgene, s.c. injection or oral administration of PTC124 restored a considerable amount of human (h) CFTR protein and function via suppressing G542X nonsense mutation [4].
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
规格：10mg 25mg 100mg 200mg
CAS：775304-57-9
别名：PTC 124;PTC-124
化学名：3-[5-(2-fluorophenyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]benzoic acid
PTC124(Ataluren)分子式：C15H9FN2O3
分子量：284.24
溶解度：≥ 10.6mg/mL in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
| 产品名称 | PTC124(Ataluren) | 产品货号 | CS-01Y75259 |
| 规格 | 10mg 25mg 100mg 200mg | CAS号 | 775304-57-9 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C15H9FN2O3 |
| 分子量 | 284.24 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
PTC124 is a selective inhibitor of nonsense mutations with IC50 value of 0.1μM [1].Nonsense mutation is a point mutation in a sequence of DNA which promotes premature translational termination. Different from missense mutation, nonsense mutation means a single nucleotide is changed and results in the substitution of a different amino acid. It has been reported that some genetic disorders (thalassemia, DMD, CF, Hurler syndrome) are correlated with nonsense mutation [1, 2].PTC124 is a potent nonsense mutations inhibitor. When tested with human or mdx mice primary muscle cells expressing dystrophin nonsense alleles, 2-8 weeks treatment of PTC124 enhanced the production of dystrophin [1]. In iPSC-derived RPE cells with nonsense mutation c.519C>T (p.R120X), PTC124 treatment restored endogenous, full-length RP2 protein with near 20% [3]. When tested with COS7 cells carrying the nonsense mutation pDsRed-EGFPmtag-Y445X, EGFP transcript level was increased after treated by PTC124 in a dose-dependent manner [2].In mdx mice model, oral administration of PTC124 for 2-8 weeks rescued striated muscle function [1]. In a model of Cftr-/- mice expressing a human CFTR-G542X transgene, s.c. injection or oral administration of PTC124 restored a considerable amount of human (h) CFTR protein and function via suppressing G542X nonsense mutation [4].
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| Recombnant Human LC9A3R2, N-H | AK6 Antibody Blocking Peptide |
| Recombinant Human CK2A1 | Recombinant Human ING3 |
| G6PC2 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human SSX1 |
| PSTK Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human USP14 |
| GPR75 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human DNAJB11 |
| PCTP Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human MBD4 |
| TNRC18 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Mouse MCP5 |
| FAM21C Antibody Blocking Peptide | 锚定蛋白重复结构域蛋白激酶ANKK1封闭多肽 |
| Recombinant human CK18 protein, C-His | Recombinant Human Flagellin |
| IRX3 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human Granulin |
| ZNF98 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human RNMT |
| SCX Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human SNIP1 |
| SLC22A6 Antibody Blocking Peptide | PTC124(Ataluren)Recombinant Mouse HMGB1 |
| Recombinant human IgG4 Fc protein,(HEK293) | Recombinant Rat Mouse TWEAK |
| NUP155 Antibody Blocking Peptide | Recombinant Human MARCKS |
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文献和实验相关实验
一．打开电源，仪器进行自检。约1分钟后自检结束，窗口显示主菜单：Run Enter List Edit Files Setup 。二．将装有样品的已经封口的离心管或96孔板放入相应的Block。三．编制程序：1．将光标移至主菜单中“Enter”处，按“Proceed”键，输入程序的文件名，用左右箭头键变换英文字母，按“Proceed”键。2．“Control method”中选择“CALCULATED”，按“Proceed”键。3．Step 1选择“Temp”，按“Proceed”键
操作步骤 1. 启动DNA引擎。 2. 启动程序：从主菜单中选择“Enter”，按Proceed 键。 3. 程序命名：按Select 键前后翻找字母和符号，找到后按Proceed 键选定该字符，同时光标右移一格。数字和破折号可以通过按小键盘上相应的键来插入。名字输入完毕，按一次Proceed 键确认最后一个字符，再次按Proceed 键确认整个名字。
Single palpable nodules of the thyroid gland are common in clinical practice; the majority of such lesions are benign. However, noninvasive thyroid nodules that exhibit borderline morphological signs of papillary cancer represent a diagnostic
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