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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
2年
- 供应商:
上海莱枫生物科技有限公司
- 保存条件:
室温
- 规格:
过柱法 50次/过柱法 100次/磁珠法 48次/磁珠法 96次
| 规格: | 过柱法 50次 | 产品价格: | ¥450.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 过柱法 100次 | 产品价格: | ¥850.0 |
| 规格: | 磁珠法 48次 | 产品价格: | ¥420.0 |
| 规格: | 磁珠法 96次 | 产品价格: | ¥800.0 |
FFPE RNA/DNA提取试剂盒不使用二甲苯等有机溶剂,可直接从石蜡包埋组织/切片中分别提取RNA和DNA。优化的裂解条件能在20 分钟左右分散厚度≤10μm的组织切片,约30分钟即可充分释放RNA(此时DNA处于未溶解状态),通过离心可实现RNA和DNA的分别提取,电泳观察获得的RNA可见明显的18S RNA和少量28S RNA。
后续提取过程可采用硅胶膜吸附过柱法或者磁珠法。磁珠法试剂预分装于96孔板,配套使用16/32/48通道核酸纯化仪,洗脱体积为100 μl,洗脱液为去离子水,仪器运行时间约15分钟。
获得的DNA可直接应用于PCR、NGS等后续实验,获得的RNA可直接应用于RT-PCR。
操作流程:

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文献和实验。一项对比固定时间的实验表明 72 h固定对 RNA 完整性的影响不大,但可能交联严重影响大片段的扩增。 与 RNAlater 及 20 h 固定相比,72 h 固定后,较大片段(红色)扩增失败概率更大 取材 取材是标本处理的第一步,由于下一步操作使用脱水机的程序是一定的,因此规范取材是获得优良切片的前提,取材不规范,厚薄不均,往往会造成组织固定、脱水、透明、浸蜡不佳。 组织块大小以 1.5 cm x 2.0 cm x 0.2-0.3 cm 为宜,组织的大小与厚薄不要把一次性包埋盒的空间
,用以后续被玻片探针捕获结合,通过probe与组织内RNA杂交,将RNA信息转移到probe上,再将探针两端连接形成完整的DNA链。之后降解杂合RNA链形,透化释放连接probe,完成信息捕获过程。 而在玻片探针设计方面,Visium FFPE也延续了Visium的强大实力,每个捕获区域大小为6.5mm X 6.5mm,含有4992个被条形码标记的点(barcoded spots),每个spot直径55μm,spot与spot中心点之间的距离为100μm,每个spot含有上亿个可以与mRNA
10x Visium空间转录组测序针对FFPE样本的实验已经开展有一段时间了,今天小编就来总结一下整个实验的详细流程。 首先来一张实验流程导图: 10xVisium FFPE的实验流程 FFPE样本Visium空间转录组技术流程(图片引自10x官方) 一、取材 FFPE样本取材要求组织不要大于6.5mm*6.5mm,因为10x visum的每张切片的捕获区域只能容纳6.5*6.5的组织大小,≤6.5 x 6.5 mm的组织块可与Visium











