StarLighter Script IV第一链cDNA合成

StarLighter Script IV First Strand cDNA Synthesis Kit

（StarLighter Script IV 第一链cDNA合成试剂盒）

产品简介

本试剂盒采用新一代逆转录酶（第四代基因工程改造酶）研制的一管式逆转录 Mix, 包含了逆转录所需的逆转录酶、随机引物、Oligo dT 等反应组分，可在体系中直接加入 RNA 模板即可进行逆转录反应。新一代的逆转录酶耐受高温，可在 42°C-65°C 温度下表现出良好的逆转录活性， 能有效逆转录复杂结构的 RNA。

 

产品优势

1. 耐高温、有效逆转录结构复杂的 RNA 模板；

2. 逆转录效率高， 准确反映模板信息；

3. 兼容高 GC/AT 模板以及降解样本，操作简单。

 

产品应用

1. 基因表达分析；

2. RNA 病毒检测；

3. 极低拷贝基因检测。

产品性能

1、 逆转录结果准确反映模板量信息

以 RNA 起始量为 0.2 ng-2000 ng 进行反转录，用 qPCR 进行定量，反转录模板量对应的 log 值与 qPCR Ct 值之间有很好的线性关系。

Fig.1 不同试剂逆转录的产物 qPCR 结果比较。以起始量 0.2 ng-2000 ng 的人 Hela 细胞系 RNA（已去除DNA) 为模板进行逆转录，取 1/10 体积逆转录产物作为定量模板，并用启衡星 Starlighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验（YWHAZ 引物，产物 249 bp，产物 GC 含量44.6%），以逆转录模板对应的 log 值与 qPCR Ct 值进行作图，启衡星以及供应商 TA2、AB-III 表现出非常好的线性关系，且扩增效率 在95-110％之间。

2、逆转录效率高

GC 含量为 60-75%，启衡星逆转录试剂和 AB-III 在 4 ng-2000 ng 范围内均表现出很好的逆转录效率。

Fig.2 不同试剂的逆转录效率比较。将 1000 ng RNA input 的逆转录效率设为 100%，根据试验结果计算各试剂盒自身在不同起始量时的相对逆转录效率。

3、轻松应对高 GC 模板的逆转录及定量

对于 GC 含量为 75.5％ 基因（人 ApoE)逆转录及定量，启衡星逆转录试剂盒获得极好的 input 及 output 线性关系， R2=1。

Fig.3 用不同试剂逆转录的产物进行 qPCR 定量，比较高 GC 片段定量结果。以不同起始量的人 Hela 细胞系 RNA（已去除DNA) 为模板进行逆转录，取 1/10 体积逆转录产物作为定量模板，并用启衡星 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验(ApoE 引物，产物 322 bp, 产物GC 含量 75.5%)，比较不同逆转录试剂的逆转录 RNA 量与 qPCR Ct 值间的线性关系。

4、轻松应对降解、 低起始量样本

Tab.1 StarLighter Script RT all-in-one Mix 逆转录不同完整性的 RNA 模板，逆转录产物定量结果展示。以不同降解程度的 RNA 为模板，连续梯度稀释 (20-0.2 ng) 为模板进行反转录，取 1/10 体积逆转录产物作为定量模板，并用启衡星 StarLighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验。启衡星逆转录试剂盒均能有效逆转录，且模板量 Log 值与 Ct 值之间表现出极好的线性关系，扩增效率在 90-110％ 之间。

5、兼容多种类型样本

与供应商 TA2、TS 相比，启衡星逆转录试剂盒在各种不同样本中均表现出良好性能，Ct 值更低。

Fig.4 不同试剂对不同物种的 RNA 进行逆转录，并对产物进行定量。以不同物种的 RNA 200 ng 为模板进行逆转录，取 1/10体积逆转录产物定量模板，并用启衡星 StraLighter SYBR Green qPCR Mix 进行定量实验，比较不同逆转录试剂的 Ct 值。