25cm一次性细胞刮刀

A protocol for cleaning and reusing the large 25 x 25 cm plates

We regularly reuse our large 25x25 cm plating trays; initially, however, we were plagued by gross microbiological contamination when reusing the trays. Various combinations of cleaning with a laboratory dishwasher, ethyl alcohol, and UV

RAW264.7细胞株的传代

-EDTA消化，25cm培养瓶加0.4ml， 37度消化5min，镜下看到细胞变圆，间隙增大。3)立即加含10%FCS的培养液终止消化，用细胞刮刀轻刮，注意，这时候用吸管吹不下来，但是刮刀却很容易刮下来，而且对细胞的损伤极小4)离心，弃上清，加新的培养液(10%FCS)，小心吹匀，分装入新的培养瓶此法屡试不爽，细胞生长饱满圆润，再也没出现过以前那种情况。

细胞培养注意事项（入门级）

达到70－80%就可以传代。早点传代也可以。如果是贴壁生长的细胞：1） 培养皿/瓶用枪头或移液管吸去原培养液；2） 无菌PBS或无菌生理盐水洗涤3次（按培养体积加入）；3） 加入适量胰酶消化适当时间（一般胰酶为0.25%；9cm/10cm培养皿和25cm培养瓶，一次加入1mL胰酶。消化时间视细胞类型等多种情况综合考虑，一般如果是细胞株，非原代培养，消化1－2分钟足矣）；4） 用枪头吹打数十次（视细胞类型而定。一般细胞株30－50次吧，耗时一般2分钟左右）；5） 加入适量体积完全培养基终止