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低温
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见标签
- 供应商:
Gibco
- 规格:
100mL
Gibco™ 胰蛋白酶-EDTA 由胰蛋白酶粉(来自猪胰腺的蛋白酶辐照混合物)制成。鉴于其消化强度,胰蛋白酶溶液被广泛用于细胞解离、常规细胞培养传代以及初生组织解离。使用不含钙和镁的平衡盐溶液可将浓缩形式的胰蛋白酶以无菌方式稀释至 1X。解离所需的胰蛋白酶浓度因细胞类型和实验要求而异。了解完整的 Gibco™ 胰蛋白酶溶液以及推荐的解离条件。
我们提供各种胰蛋白酶配方和无动物来源的 TrypLE™ 试剂,其特征包括:
•质量测试
• 记录的可追溯性
• 两地 cGMP 生产
该胰蛋白酶经过以下改良:
包含
• EDTA
不含
•酚红
可提供完整配方。
质量测试
Gibco™ 胰蛋白酶溶液进行了 pH 值、渗透压、无菌性和性能测试。此外,在生产之前,原材料均经过电子束辐照验证和内毒素、PPV、PCV 1/2、支原体、细菌、真菌和病毒污染检测,还进行了多种活性测定、灰分分析和水分分析。
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文献和实验问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
2、器材(1)胰脏(2)组织捣碎机(3) 离心机(4)磁力搅拌器(5)透析袋、20目筛网、纱布、水浴锅(6)烧杯、量筒、刻度吸管、 试管 、玻璃漏斗(7)布氏漏斗、抽滤瓶、温度计、滴管、玻璃搅棒、纱布、pH试纸等 [方法和步骤] 方法一1、 胰蛋白酶原的提取取新鲜胰脏约150g,剥去结缔组织和脂肪,取净重100g,切成碎块,在组织捣碎机中捣碎,并加入2倍体积预冷的pH2.5~3.0乙酸化水溶液,制成匀浆。浆液倒入500mL烧杯中,用10
mM Gly-NaOH(pH 9~12),所有缓冲液均为 25℃ 下配制。底物在 25℃ 温浴 10 分钟后,开始测活。 2. pH 稳定性的研究 取活性为 10 mg/ml 纯酶液,分别在 pH 3~12 缓冲液中稀释 10 倍,在 25℃ 下温浴 2 h,取样品测定酶活,以水浴前酶液初始活性作为 100%,计算残余活性。缓冲液依次为 25 mM NaAc-HAc (pH 3~6),25 mM Tris-HCl (pH 7~8),25 mM Gly-NaOH (pH 9~12),所有缓冲
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