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- 2026年01月20日
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Invitrogen
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Thermo Fisher Scientific可提供一系列经验证的针对TrueGuide Synthetic gRNA 产品线的全面阴阳对照，帮助提升基因编辑的效率。此阳性对照品针对基因的 ROSA26 靶标内含子区域，可在多种小鼠细胞系中实现高达 80% 的编辑效率。使用 ROSA26 对照品可以轻松确定将 CRISPR/Cas9 工具递送至细胞类型的较佳条件，以便有把握地在编辑实验中取得进展，并较大限度地减少分离和验证编辑克隆的下游工作量。
内容与储存
以干燥 RNA 形式提供。干燥 RNA 在室温下储存；混悬 RNA 在 -5 至 -30°C 下储存。混悬于无核酸酶水或 TE。
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文献和实验近日，Cruiser™与市面上易出现假阳性的X错配酶，进行比较，实验结果见下： 下图为3T3细胞FADD基因敲除，已知在3T3细胞中FADD基因的敲除效率很低（其敲除pool测序无双峰），挑24个单克隆后经X酶切结果显示如图2，而经Cruiser™酶切结果显示如图3 图2 3T3细胞FADD基因X酶检测电泳图 图3 3T3细胞FADD基因Cruiser™检测电泳图 P1—Cruiser™酶切阳性对照 P2—X酶切阳性对照 结论：如上图结果显示，X酶
体（P65 和 HSF1 都是强激活域）； modified sgRNA（sgRNA 2.0）：在 gRNA 骨架上插入 MS2 发夹序列，作为 MS2 融合蛋白的对接位点。 工作时，dCas9-VP64 通过 gRNA 结合到靶基因启动子，sgRNA 上的 MS2 发夹再招募 MS2-P65-HSF1，形成多激活域协同作用，激活强度远高于单独的 dCas9-VP64。 其他可选的激活系统还有 VPR（VP64-p65-Rta 三联融合）、SunTag（串联表位招募多拷贝激活域）等，各有强弱，SAM
扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是，需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料，用以校正仪器系统以外的物理误差，比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的，当用此类试剂的时候，应该将 ROX 参比
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