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Invitrogen
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Thermo Fisher Scientific可提供一系列经验证的针对TrueGuide Synthetic gRNA 产品线的全面阴阳对照,帮助提升基因编辑的效率。此阳性对照品针对基因的 ROSA26 靶标内含子区域,可在多种小鼠细胞系中实现高达 80% 的编辑效率。使用 ROSA26 对照品可以轻松确定将 CRISPR/Cas9 工具递送至细胞类型的较佳条件,以便有把握地在编辑实验中取得进展,并较大限度地减少分离和验证编辑克隆的下游工作量。
内容与储存
以干燥 RNA 形式提供。干燥 RNA 在室温下储存;混悬 RNA 在 -5 至 -30°C 下储存。混悬于无核酸酶水或 TE。
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文献和实验近日,Cruiser™与市面上易出现假阳性的X错配酶,进行比较,实验结果见下: 下图为3T3细胞FADD基因敲除,已知在3T3细胞中FADD基因的敲除效率很低(其敲除pool测序无双峰),挑24个单克隆后经X酶切结果显示如图2,而经Cruiser™酶切结果显示如图3 图2 3T3细胞FADD基因X酶检测电泳图 图3 3T3细胞FADD基因Cruiser™检测电泳图 P1—Cruiser™酶切阳性对照 P2—X酶切阳性对照 结论:如上图结果显示,X酶
扩增曲线的分析攻略。 1、确认软件设置是否正确 对照试剂盒说明书,检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是,需要看下所选用的试剂中是否含有 ROX 来作为参比荧光染料。Applied Biosystems™ 系列荧光定量 PCR 仪器可以用 ROX 来作为参比荧光染料,用以校正仪器系统以外的物理误差,比如均一化校正由于移液误差或者蒸发导致的批内体积误差等。目前市面上有的的荧光定量 PCR 预混液是不含有 ROX 的,当用此类试剂的时候,应该将 ROX 参比
怎么整板都没有扩增曲线,是哪一步实验出问题了吗? 这个病原体这段时间怎么经常检出?不会是有污染了吧? 在您看到荧光定量 PCR 结果的时候是否也有过这样的疑问?隐隐约约感觉实验某个步骤出现问题,却又不知该从何下手。别担心,有「对照精灵」们来助您一臂之力。 荧光定量 PCR 实验,从样本采集到结果分析包含多个实验步骤,针对不同的步骤,可以选择不同的对照对流程进行监控(图 1)。 图 1. 实验流程和常见阴阳性对照种类。 阴性对照 荧光定量 PCR 的灵敏度可以达到 1 拷贝/孔,如此高灵敏
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