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低温
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见标签
- 英文名:
SDWJS S HCLFM
- 库存:
现货
- 供应商:
Gibco
- 规格:
50mg
杀稻瘟菌素 S 是从灰色链霉菌中分离出的一种肽基核苷类抗生素。它是细菌和真核细胞中蛋白合成的强效抑制剂,同时在真菌、线虫和肿瘤细胞中也具有活性。杀稻瘟菌素 S 通过阻断释放因子诱导的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽键形成。可用作哺乳动物细胞和细菌细胞的选择剂。建议的工作浓度介于 1 至 30 µg/mL 之间,具体取决于细胞系,用于细菌选择的浓度为 25–100 µg/mL。迅速发生细胞死亡,可在不到一周内生成对杀稻瘟菌素稳定耐药的哺乳动物细胞系。
携带 BSR 和 BSD(分别从蜡样芽孢杆菌 K55-S 和土曲霉中分离出)可获得杀稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化杀稻瘟菌素 S 转化为脱氨基羟基杀稻瘟菌素 S。脱氨基羟基稻瘟菌素 S 是杀稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物,不与原核或真核核糖体相互作用或抑制二者。BSD 抗性基因也编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化与 BSR 脱氨酶类似的反应。
要进行细菌选择,LB 培养基的盐含量必须保持低水平
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文献和实验|乌贼蛋白[一种钙结合蛋白] stagger|交错切口 staphylocoagulase|(葡萄球菌)凝固酶 staphylococcin|葡萄球菌素 staphylokinase|葡激酶 staphyloleukocidin|葡萄球菌杀白细胞素 staphylolysin|葡萄球菌溶血(毒)素 star activity|星号活性 statin|抑制
)、刻度试管5.0m1(×18)、 吸管0.10mL(×l)、0.50mL(×4)、l.0mL(×2)、 5.0m1(×l)、电子天平、722 型(或7220 型)分光光度计、容量瓶10mL(×l)。 原料 卵清蛋白或其他蛋白质样品 试剂 1. 2%卵清蛋白液:称取0.5g 卵清蛋白,溶于蒸馏水①(为了减少蛋白质变性,溶解时只能用玻棒轻缓搅动。)离心去除不溶物,取上清液加水稀释至25mL 。 2. 尿素(A.R.):粉末状。 3. 半恍氨
培养基中,37℃振摇过夜。 (2)接种25ml过夜培养物于500ml LB培养基,37℃振摇,至OD600 达到0.4. (3)迅速将培养物置于冰浴中30min,至充分冷却。 (4)将菌液转移至预冷的离心管中,4℃下以2500r/min离心15 min,弃培养液,回收细胞。 (5)以10ml预冷的10%甘油洗涤沉淀,低温离心,共两次。 (6)加约1ml(适量)预冷的10%甘油重悬沉淀,稀释悬液100倍,测量OD600,至稀释浓度为2-3×1010个细胞/ ml (1.0 OD600约
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