土壤DNA提取试剂盒(珠磨法)

本产品可媲美进口品牌，提取的DNA，经过PCR验证，腐殖酸含量低，可进行下游各类实验，同时用户可免费申请试用装，欢迎联系索取！

 

产品信息 

 

产品名称	产品编号	规格
土壤DNA提取试剂盒(珠磨法)	HRQ0621	50 T

 

产品描述

        土壤样品存在大量的抑制因子如腐殖酸、金属离子等，而纯化DNA中只要有这些微量物质的存在就会影响到PCR等酶促反应，因而纯化土壤DNA最大的问题是如何有效地去除土壤中的这些抑制因子。本产品采用DNA结合柱纯化方式，应用了独特的溶液系统，能有效去除土壤样品中各种抑制因子。一次实验可同时处理一个或多个0.1-1.0g左右的土壤样品，纯化的DNA可直接用于PCR反应，酶切或定量实验。

 

产品组分

 

组分	存储	50T
Buffer SH	室温	40mL
Buffer SD	室温	10mL
Buffer BB	室温	30mL
Buffer SW	室温	25mL
Buffer SG	室温	24mL 第一次使用前请加入56mL无水乙醇
Buffer SE	室温	10mL
DNA吸附柱和收集管	室温	50套

 

产品特点

1.不使用有毒的ben酚，氯仿等试剂。

2.简捷，单个样品操作一般可在60分钟内完成。

3.适应性比较广泛，可以提取包括堆肥、沉积物和粪肥等各类土壤。

4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值高达 1.7～1.9，可直接用于PCR，Southern-blot 和各种酶切反应。

 

运输和保存方法

1、本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。

2、试剂盒储存于低温（4℃或者-20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15-25℃）进行。

3、避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

 

使用前必读

1、实验过程使用的离心机均可在室温进行（4℃也可以），转速可以达到12,000rpm的传统台式离心机。

2、需要自备乙醇、RNase A（100mg/mL）等。

3、样品处理量不能超过离心柱的处理能力，否则容易导致DNA产量降低。

4、SD、BB和SW中含有刺激性化合物，操作时务必戴手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

5、开始实验前将需要的水浴先预热到 65℃备用。

 

使用方法

提示：

→第一次使用前请先在 Buffer SG中添加指定量的无水乙醇，并做好标记！

 

1、称取新鲜土壤0.25g于研磨管（包含研磨珠）中，加入720μL的Buffer SH，在漩涡振荡器上振荡5min，65 ℃恒温水浴15min，每5min摇匀一次。

2、将EP管从水浴锅中取出，冷却至室温，向收集管中加入70μL溶液Buffer SD，混合均匀后在65℃下水浴1min，混合均匀，12,000rpm离心2min，留取上清液。

3、将步骤2获得的上清液转移到新的EP管中，随后加入所述上清液1/2体积的溶液Buffer BB，混合均匀，12,000rpm离心2min，留取上清液。

4、将步骤3获得的上清液转入DNA吸附柱中，吸附柱置于收集管内，静置3min，12,000rpm离心2min，弃废液，保留DNA吸附柱。

5、将步骤4获得的DNA吸附柱重新放入收集管中，向DNA吸附柱中加入500μL溶液Buffer SW，12,000rpm离心2min，弃废液，保留DNA吸附柱。

6、将步骤5获得的DNA吸附柱放入收集管中，向DNA吸附柱中加入700μL溶液Buffer SG，12,000rpm离心2min，弃废液，保留DNA吸附柱；重复一遍，向DNA吸附柱中再次加入700μL溶液Buffer SG，12,000rpm离心2min，弃废液，保留DNA吸附柱。12,000rpm空管离心2min，以去除乙醇的残留。

7、将步骤6获得的DNA吸附柱于室温至50℃下静置5min直至酒精全部挥发完。

8、 将步骤7获得的DNA吸附柱放入新的EP管内，向DNA吸附柱中加入50-100μL溶液Buffer SE，静置2min，12,000rpm离心2min，将离心液再次加入DNA吸附柱中，12,000rpm离心2min，离心液即为土壤DNA溶液。

 

注：本产品仅作科研用途！