Granzyme H 多克隆抗体

多克隆抗体制备流程

抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。一般而言，抗体按靶位点不同主要分为单克隆抗体和多克隆抗体 ，由多个B淋巴细胞克隆产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体 ， 本篇主要讲述兔源性多克隆抗体制备的相关流程。抗原有两个基本特性，即抗原性和免疫原性。有抗原性的物质不一定有免疫原性，所以由此引出半抗原和完全全抗原，半抗原必须经过经过一定的改造（偶联蛋白载体

DEAE-Sephadex A-50提取法纯化多克隆抗体

DEAE-Sephadex A-50 提取法纯化多克隆抗体       DEAE-Sephadex A-50(简称A-50)为弱碱性阴离子交换剂，经过NaOH处理将Cl- 型转为OH- 型后，可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白属中性蛋白，等电点为pH6.85～7.5，其余均属酸性蛋白。在溶液为pH8.0时，酸性蛋白均被A-50 吸附。从而可分离纯化IgG。       1. 批量吸附法     此法可在1天内完成提取过程，纯化前后样品体积变化不大，

进阶：6 年免疫组化经验总结

5、切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长（大于 24 h）：原因上不清楚，但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复，第二天加抗体进行免疫组化染色，如果将装有切片和修复液的容器放在 4ºC 冰箱过夜，对结果无明显影响，如果放在室温，特别是炎热的夏天，会出现背景着色，因此，不可存放时间太长。   6、一抗变质、质量差的多克隆抗体：注意抗体的有效期，过期的抗体要么不显色要么背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。