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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8度
- 保质期:
24个月
- 英文名:
mPEG-Silane, MW 5,000 - 1 gram
- 库存:
100
- 供应商:
Laysan Bio
- 规格:
1g
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文献和实验改善EMSA的电泳结果。如需纯化,可以按照如 下步骤操作:(1) 对于100微升标记好的探针,加入1/4体积即25微升的5M醋酸铵,再加入2体积即200微升的无水乙醇,混匀。(2) 在-70℃至-80℃沉淀1小时,或在-20℃沉淀过夜。(3) 在4℃,12, 000g-16, 000g离心30分钟。小心去除上清,切不可触及沉。(4) 在4℃,12, 000g-16, 000g离心1分钟。小心吸去残余液体。微晾干沉淀,但不宜过分干燥。(5) 加入100微升TE,完全溶解沉淀。标记好的探针最好立即使用
细胞融合的方法有物理法,如电融合、激光融合,化学融合法和生物融合法,如仙台病毒,此处例举化学融合法中的一种即聚乙二醇融合法。 聚乙二醇(PEG),在分子量为200~700时,呈无色、无臭的粘稠状液体,分子量大于1 000时,呈乳白色蜡状固体,能溶于水、乙醇及其他许多有机溶剂,对热稳定,与许多化学药品不起作用。用作细胞融合剂的聚乙二醇一般选用分子量为4 000者,常用浓度为50%,pH8.0~pH8.2(用10%NaHCO3 调整),分子量小的PEG,融合效应差,又有毒
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
,可用下式表示:因此,测定某个蛋白质的分子量,只需比较它和一系列已知分子量的蛋白质在SDS-凝胶电泳时的迁移率就可以了。后来,Weber等人基本按Shapiro的方法对约40种蛋白质进行了研究,进一步证实了这个方法地可行性(见图16-1)。用这种方法测定蛋白质的分子量,简便、快速,只需要廉价的设备和微克量的蛋白质样品;所得结果,在分子量为15,000~200,000的范围内,与用其他方法测得的分子量相比,误差一般在±10%以内。因此,近几年来,SDS-凝胶电泳测定分子量的方法,已得到非常广泛的应用
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