2.0ml螺口带盖离心管，彩色盖，可立，带O型环，聚丙烯，灭

写给细胞小白的实用手册

灯进行整体消毒。长期未使用的细胞房在实验前需要用 20% 乙酸蒸 24 h。2. 二氧化碳培养箱消毒二氧化碳培养箱定期需要用 70% 乙醇擦拭托盘和内壁，同时使用手提紫外灯进行消毒。培养箱低端托盘的水也要为无菌水，并两周更换一次。3. 器皿灭菌、消毒玻璃器皿和螺口盖采用高压灭菌（121 ℃，100 kPa，20 min），玻璃器皿包括移液管、冻存瓶、盖玻片、载玻片、玻璃注射器、玻璃试管、吸管等。 螺口盖的盖子分为有內垫的金属或酚醛树脂盖、聚丙烯盖子、硅树脂盖子、白橡胶盖子。塑料器皿的消毒通常采用紫外

质粒DNA的提取与鉴定

溶液Ⅲ(冰上预冷)，盖紧管口，颠倒数次使混匀。 7.1200rpm，离心15 min，将上清转至另一离心管中。 8.向上清中加入等体积酚：氯仿(去蛋白)，反复混匀，12000rpm，离心5min,将上清转移到另一离心管中. 9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体。 10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，振荡并离心，倒去上清液，真空抽干或空气中干燥

SDS裂解法提取大量质粒

本法的产量低得多，但却比其他方法更温和，是提取大质粒（大于15kb）的首选方法。 试验步骤： 1. 将500ml细菌沉淀物洗过后重悬于10ml用冰预冷的10%蔗糖、50mmol/L Tris.Cl(pH8.0)溶液中，将悬液移至30ml的带盖螺口塑料试管中。 2. 加入2ml新配制的溶菌酶溶液[10mg/ml,溶于10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)]。当溶液的pH值小于8.0时，溶菌酶不能有效地发挥作用。 3. 加8ml 0.25mol/L EDTA(pH