敲低细胞模型构建及检测

miRNA的靶基因的寻找与鉴定

、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比，对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多，目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是， 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化，从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因， 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA：方式主要有两种，一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统，一种是人工合成miRNA

腺相关病毒高分论文应用案例

了垂体单位在肿瘤免疫中的作用。为此构建了皮下移植瘤小鼠模型并检测了垂体激素的水平变化，皮下移植的细胞系包括免疫检查点疗法耐药的细胞系（LLC 肺癌细胞和 GMCSF 过表达的 B16F10 黑色素瘤细胞）和免疫检查点疗法敏感的细胞系（MC38 结肠癌细胞系和 MCA205 纤维肉瘤细胞）。结果发现，荷瘤小鼠模型血清中 α 促黑激素（α-MSH）的产生明显增加（图 1 A，B）。阿黑皮素原（POMC）经加工可产生 α-MSH，且正常情况下 POMC 主要在垂体中表达（图 1 C）。相比于对照组小鼠

Nat Methods：陈玲玲/杨力/李劲松等开发新技术，实现环状 RNA 功能性筛选和研究

(Cas13b)、VI-C (Cas13c) 和 VI-D (Cas13d)，用于 RNA 敲低、定点编辑、检测以及剪接调控等。 CRISPR 系统筛选功能性 circRNA中国科学院上海营养与健康研究所（中科院 - 马普学会计算生物学伙伴研究所）研究员杨力与中科院分子细胞科学卓越创新中心研究员陈玲玲、研究员李劲松等团队合作，2020 年 12 月 7 日在国际学术期刊 Nature Methods 上，发表了题为 Screening for functional circular RNAs