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- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 检测范围：
详见说明
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
仅供科研
- 适应物种：
小鼠
- 样本：
血清等
- 规格：
48T/96T
小鼠肌球蛋白重链2(MYH2)ELISA试剂盒上海圻明生物优势现货供应。 更多产品说明书欢迎免费索取。长期大量现货供应。
仅供体外科研使用，不得用于临床诊断
【样本类型】血清、血浆、细胞上清
【产品规格】48T/96T
【检查方法】夹心法/竞争法
【贮存方法】2-8℃保存。 避免不必要的重复溶解
【有效期】6个月
小鼠肌球蛋白重链2(MYH2)ELISA试剂盒实验前预备
1. 准备工作
①仔细阅读说明书：在操作前，务必详细阅读试剂盒的说明书，了解操作步骤、注意事项及安全提示。
②样品准备：按照说明书要求处理样品，如稀释、离心等，确保样品质量。
2. 操作步骤
①包被：将特异性抗体包被于微孔板底部，形成固相抗体。
②封闭：使用封闭液封闭非特异性结合位点，减少背景干扰。
③加样：加入待测样品或标准品，与固相抗体结合。
④孵育：在适宜的温度和时间内进行孵育，使抗原抗体充分反应。
⑤洗涤：彻底洗涤未结合的成分，减少非特异性结合。
⑥加酶标抗体：加入酶标二抗，与已结合的抗原形成复合物。
⑦再次孵育与洗涤：重复孵育和洗涤步骤。
⑧显色：加入底物，在酶的催化下发生显色反应，颜色深浅与待测物浓度成正比。
⑨终止反应与读数：加入终止液终止反应，使用酶标仪测定吸光度值。
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文献和实验途径不同而异，以获得高效价抗体为最终目的。免疫间隔一般2～3周。一般被免疫动物的血清抗体效价越高，融合后细胞产生高效价特异抗体的可能性越大，而且单克隆抗体的质量（如抗体的浓度和亲和力）也与免疫过程中小鼠血清抗体的效价和亲和力密切相关。末次免疫后3～4天，分离脾细胞融合。 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备 选择瘤细胞株的最重要的一点是与待融合的B细胞同源。如待融合的是脾细胞，各种骨髓瘤细胞株均可应用，但应用最多的是Sp2/0细胞株。该细胞株生长及融合效率均佳，此外，该细胞株本身不分泌任何免疫球蛋白重链
抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞 抗原，可取1×107个细胞 作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化，如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原，可将抗原所在的电泳条带切下，研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞 同源的BALB/c健康小鼠，鼠龄在8～12周，雌雄不限。为避免小鼠反应而不佳或免疫过程中死亡，可同时免疫3～4只小鼠。 免疫过程和方法与多克隆 抗血清制备基本
细胞悬液。该细胞悬液中若仍混有红细胞，离心后加0.83%的氯化铵溶液，室温10分钟，洗涤一次即可。将该细胞悬液稀释至适当浓度。 c、每孔加100ul上述a或b的细胞悬液，使每孔含细胞5×104个；1500r/min 15分钟，甩去上清；室温干燥或吹干后用丙酮-甲醇（1：1）4℃固定10分钟；可4℃或-20℃保存备用。 d、以下步骤同上法。 ⑤抗体捕捉ELISA试验 本法用抗BALB/c小鼠Ig的多克隆抗体捕捉待检样品中的McAb，再依次加抗原、酶标多克隆抗体及底物显色。该法是常用的ELISA中较理想
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