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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
圻明生物
- 检测范围：
详见说明
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
仅供科研
- 适应物种：
小鼠
- 样本：
血清等
- 规格：
48T/96T
小鼠新饱食分子蛋白1(Nesfatin-1)ELISA试剂盒上海圻明生物优势现货供应。 更多产品说明书欢迎免费索取。长期大量现货供应。
仅供体外科研使用，不得用于临床诊断
【样本类型】血清、血浆、细胞上清
【产品规格】48T/96T
【检查方法】夹心法/竞争法
【贮存方法】2-8℃保存。 避免不必要的重复溶解
【有效期】6个月
小鼠新饱食分子蛋白1(Nesfatin-1)ELISA试剂盒实验前预备
1. 准备工作
①仔细阅读说明书：在操作前，务必详细阅读试剂盒的说明书，了解操作步骤、注意事项及安全提示。
②样品准备：按照说明书要求处理样品，如稀释、离心等，确保样品质量。
2. 操作步骤
①包被：将特异性抗体包被于微孔板底部，形成固相抗体。
②封闭：使用封闭液封闭非特异性结合位点，减少背景干扰。
③加样：加入待测样品或标准品，与固相抗体结合。
④孵育：在适宜的温度和时间内进行孵育，使抗原抗体充分反应。
⑤洗涤：彻底洗涤未结合的成分，减少非特异性结合。
⑥加酶标抗体：加入酶标二抗，与已结合的抗原形成复合物。
⑦再次孵育与洗涤：重复孵育和洗涤步骤。
⑧显色：加入底物，在酶的催化下发生显色反应，颜色深浅与待测物浓度成正比。
⑨终止反应与读数：加入终止液终止反应，使用酶标仪测定吸光度值。
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文献和实验,一个工作日基本搞定.下面就由我抛砖引玉地来说一下,做ELISA的经验总结:1.包被原的性质很重要,蛋白浓度,是否降解,这关系到你做出的抗体可不可以被其识别,所以保存抗原很重要,我做重组蛋白时,师兄都严格警告我一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理.还有有的包被原可能不是蛋白,对于生物素和脂类物质或小分子物质我们要事先对其改造再加以包被,我把方法简要的列出如下:①亲和素生物素:先亲和素先包被载体，加入生物素化的DNA，这种包被方法均匀、牢固，已扩大应用于各种抗原物质的定量测定。②脂类物质:可将其在有机
ELISA是一种免疫测定。免疫测定（immunoassay，IA）是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。一、抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后，可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中，抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的，称为半抗原（hapten）。例如某些激素、药物等。抗原的反应性取决于抗原
组 DNA 很大，而且与部分蛋白质结合，也造成了共沉淀。6. 在小离心机中 12 000 rpm，4 ℃，离心 5 min，将上清转移到新离心管中。Tips：经过离心，不溶的大分子核酸，蛋白质等物质被沉淀下去，而可溶的质粒在上清中。7. 加等体积得酚: 氯仿，振荡混匀，用微量离心机于 4 ℃ 以 12 000 g 离心，上清转移到另一离心管中。 Tips：虽然经过沉淀可以去除大部分蛋白质，但还是有部分蛋白残留，所以利用蛋白质在酚中强烈变性，可以比较彻底的将蛋白质抽提掉。酚在水中微溶，所以加入氯
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