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乙酸钠溶液(2mol/L,pH4.0,RNase free)优惠价格
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999
- 供应商:
上海圻明
- 规格:
500ml
乙酸钠溶液(2mol/L,pH4.0,RNase free)优惠价格购买欢迎来电垂询,上海圻明生物优势现货供应。
产品应用PCR、定量PCR、蛋白电泳纯化、克隆工具酶系列等。更多产品资料欢迎免费索取。
1. 使用前将 Calcein AM 和 EthD-1 溶液瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. Calcein AM 和 EthD-1 为荧光染料,均存在荧光淬灭的可能性,实验操作时注意尽量避光,以减缓荧光淬灭。
3. Calcein AM 需要保存在封闭、干燥的环境中,在潮湿环境容易水解,因此建议首次使用按照实验需求进行分装(本产品的包装袋中放置了干燥剂,分装后建议放回原包装袋,
密封保存)。
4. Calcein AM 在水溶液中容易水解,因此 Calcein AM 工作液必须现配现用。
5. 血清对细胞染色有一定的干扰,建议实验时尽量用不含血清的缓冲液。
1) 准备染色工作液及按上述步骤染色细胞。另外,分别准备 1 ml 2μM Calcein AM
和 4μM EthD-I 溶液,按照下列组别进行染色。对于下面组别的细胞或无细胞
组,需要保持检测工作液浓度、孵育时间和孵育温度的完全一致。
2) 样品组及对照组测量:
A. 样品组在 645 nm 处的测量值,记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(645)sam。
B. 样品组在 530 nm 处的测量值,记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(530)sam。
C. 死细胞 EthD-1 单染对照组在 645 nm 的测量值,记为 Calcein AM =F(645)max。
D. 死细胞 Calcein AM 单染对照组在 645 nm 的测量值,记为 Calcein AM =F(645)min。
E. 活细胞 EthD-I 单染对照组在 530 nm 的测量值,记为 EthD-I=F(530)min。
F. 活细胞 Calcein AM 单染对照组在 530 nm 的测量值,记为 Calcein
AM=F( 530 ) max。
G. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可),530 nm 处的检测值记为
F(530)0。
H. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可),645 nm 处的检测值记为
F(645)0。
3) 根据测量数据计算死细胞与活细胞的比例:
% Live Cells=
F(530)sam−F(530)min
F(530)max−F(530)min
×100%
% Dead Cells=
F(645)sam−F(645)min
F(645)max−F(645)min
×100%
使用 70%甲醇致死处理 293T 细胞,用 2μM Calcein AM 和 4μM EthD-1 的染色工作液对细胞染色 20 min 后进行荧光显微镜观察,结果如图 2 所示。

pcDNA3.1/pre-miR-204 pre-miR-204 Amp
pcDNA3.1/pre-miR-143 pre-miR-143 Amp
pcDNA3.1-LNC-REG3G-3 LNC-REG3G Amp
pcDNA3.1-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 Amp
pcDNA3.1-FGD5-AS1 FGD5-AS1 Amp
pcDNA3.1-KCNQ101T1 KCNQ101T1 Amp
pcDNA3.1-h-RSF1 h-RSF1 Amp
pcDNA3.1-h-LOXL2 h-LOXL2 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21-AS1 h-SOX21-AS1 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21 h-SOX21 Amp
pcDNA3.1-h-LINC00958 h-LINC00958 Amp
pcDNA3.1-LINC01811 LINC01811 Amp
pcDNA3.1-LOC101928219 LOC10928219 Amp
pcDNA3.1-Lnc-BCYRN1 Inc-BCYRN1 Amp
pcDNA3.1-lncRNA-ISR22 lncRNA-ISR22 Amp
pcDNA3.1-circ-001862 circ-001862 Amp
pcDNA3.1-circ0058514 circ0058514 Amp
pcDNA3.1-circ-sirt1 circ-sirt1 Amp
pSilencer-siSTX18-AS1 STX18-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-AFAP1-AS1 AFAP1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC-REG3G LNC-REG3G shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC00507 LNC00507 shRNA Amp
pSilencer-shR-RNASEH1-AS1 RNASEH1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-SPACA6P-AS SPACA6P-AS shRNA Amp
pSilencer-shR-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC00115 LINC00115 shRNA Amp
pSilencer-shR-INCRNAISR22 INCRNAISR22 shRNA Amp
pSilencer-shR-Lnc-DLK1 Lnc-DLK1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC01811 LINC01811 shRNA Amp
pSilencer-shR-LOC10928219 LOC10928219 shRNA Amp
pSilencer-shR-ADAMTS9-AS1 ADAMTS9-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0001862 circ0001862 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0058514 circ0058514 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-5193 miR-5193 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-4635 miR-4635 shRNA Amp
pcDNA3.1-ADAMDEC1 ADAMDEC1 Amp
pcDNA3.1-ASIC2 ASIC2 Amp
pcDNA3.1-Myc-B27(C-tag) B27 Amp
pcDNA3.1-BLK BLK Amp
pcDNA3.1-Braf Braf Amp
pcDNA3.1-HA-CD58 CD58 Amp
pcDNA3.1-CLIC4 CLIC4 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD134 CD134 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD274 CD274 Amp
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文献和实验10.0) 取氯化铵5.4g,加水20 ml溶解后,加浓氯溶液35 ml,再加水稀释至100 ml,即得。 硼砂―氯化钙缓冲液(PH8.0) 取硼砂0.572 g与氯化钙2.94 g,加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5 ml 调节PH值至8.0,加水稀释至1000 ml即得。 硼砂―碳酸钠缓冲液(PH10.8~11.2) 取无水碳酸钠5.30 g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91 g,加水使溶解成100 ml 临用前取碳酸钠溶液973 mol/L与硼砂溶液27 ml
细胞色素 C ( 还原型,见注释 4 ),10% ( m/V) Triton X-100,0.1 mol/L KCN。 2.6 线粒体各组分分级分离 不含 BSA 的清洗缓冲液(0.3 mol/L 甘露醇、10 mmol/L TES- KOH,pH 7.2 ) 、2 mol/L KCl 贮存液、低渗缓冲液(50 mmol/L 蔗糖、2 mmol/L EDTA、10 mmol/L MOPS pH 6.5)、2 mol/L 蔗糖、碳酸钠溶液(100 mmol/L Na2CO3) 以及微量
10 min)取上清液。 (6) 加入0.2倍体积的乙酸钠溶液(10 mol/L)和两倍体积的无水乙醇,-20℃放置2 h使DNA充分沉淀。 (7) 离心(12 000 r/min 10 min ),弃上清液,沉淀用70%乙醇(4℃)洗涤两次。 (8) 沉淀晾干(尽可能除去乙醇)后,将DNA重悬浮于TE缓冲液(pH8.0 ),于37℃中轻轻摇动有利于DNA重悬浮,使DNA充分溶解。 (9) 加入Rnase至终浓度为1 μg/mL,37℃保温1 h。 (10
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