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- 国产
- OXL0932
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃,避光,12个月
- 保质期：
见标签
- 英文名：
甲酰胺加样缓冲液(2×)优惠价格
- 库存：
999
- 供应商：
上海圻明
- 规格：
5ml
甲酰胺加样缓冲液(2×)优惠价格购买欢迎来电垂询，上海圻明生物优势现货供应。
产品应用PCR、定量PCR、蛋白电泳纯化、克隆工具酶系列等。更多产品资料欢迎免费索取。
1. 使用前将 Calcein AM 和 EthD-1 溶液瞬时离心至管底，再进行后续实验。
2. Calcein AM 和 EthD-1 为荧光染料，均存在荧光淬灭的可能性，实验操作时注意尽量避光，以减缓荧光淬灭。
3. Calcein AM 需要保存在封闭、干燥的环境中，在潮湿环境容易水解，因此建议首次使用按照实验需求进行分装（本产品的包装袋中放置了干燥剂，分装后建议放回原包装袋，
密封保存）。
4. Calcein AM 在水溶液中容易水解，因此 Calcein AM 工作液必须现配现用。
5. 血清对细胞染色有一定的干扰，建议实验时尽量用不含血清的缓冲液。
1) 准备染色工作液及按上述步骤染色细胞。另外，分别准备 1 ml 2μM Calcein AM
和 4μM EthD-I 溶液，按照下列组别进行染色。对于下面组别的细胞或无细胞
组，需要保持检测工作液浓度、孵育时间和孵育温度的完全一致。
2) 样品组及对照组测量：
A. 样品组在 645 nm 处的测量值，记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(645)sam。
B. 样品组在 530 nm 处的测量值，记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(530)sam。
C. 死细胞 EthD-1 单染对照组在 645 nm 的测量值，记为 Calcein AM =F(645)max。
D. 死细胞 Calcein AM 单染对照组在 645 nm 的测量值，记为 Calcein AM =F(645)min。
E. 活细胞 EthD-I 单染对照组在 530 nm 的测量值，记为 EthD-I=F(530)min。
F. 活细胞 Calcein AM 单染对照组在 530 nm 的测量值，记为 Calcein
AM=F( 530 ) max。
G. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可)，530 nm 处的检测值记为
F(530)0。
H. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可)，645 nm 处的检测值记为
F(645)0。
3) 根据测量数据计算死细胞与活细胞的比例：
% Live Cells=
F(530)sam−F(530)min
F(530)max−F(530)min
×100%
% Dead Cells=
F(645)sam−F(645)min
F(645)max−F(645)min
×100%
使用 70%甲醇致死处理 293T 细胞，用 2μM Calcein AM 和 4μM EthD-1 的染色工作液对细胞染色 20 min 后进行荧光显微镜观察，结果如图 2 所示。
pcDNA3.1/pre-miR-204 pre-miR-204 Amp
pcDNA3.1/pre-miR-143 pre-miR-143 Amp
pcDNA3.1-LNC-REG3G-3 LNC-REG3G Amp
pcDNA3.1-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 Amp
pcDNA3.1-FGD5-AS1 FGD5-AS1 Amp
pcDNA3.1-KCNQ101T1 KCNQ101T1 Amp
pcDNA3.1-h-RSF1 h-RSF1 Amp
pcDNA3.1-h-LOXL2 h-LOXL2 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21-AS1 h-SOX21-AS1 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21 h-SOX21 Amp
pcDNA3.1-h-LINC00958 h-LINC00958 Amp
pcDNA3.1-LINC01811 LINC01811 Amp
pcDNA3.1-LOC101928219 LOC10928219 Amp
pcDNA3.1-Lnc-BCYRN1 Inc-BCYRN1 Amp
pcDNA3.1-lncRNA-ISR22 lncRNA-ISR22 Amp
pcDNA3.1-circ-001862 circ-001862 Amp
pcDNA3.1-circ0058514 circ0058514 Amp
pcDNA3.1-circ-sirt1 circ-sirt1 Amp
pSilencer-siSTX18-AS1 STX18-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-AFAP1-AS1 AFAP1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC-REG3G LNC-REG3G shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC00507 LNC00507 shRNA Amp
pSilencer-shR-RNASEH1-AS1 RNASEH1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-SPACA6P-AS SPACA6P-AS shRNA Amp
pSilencer-shR-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC00115 LINC00115 shRNA Amp
pSilencer-shR-INCRNAISR22 INCRNAISR22 shRNA Amp
pSilencer-shR-Lnc-DLK1 Lnc-DLK1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC01811 LINC01811 shRNA Amp
pSilencer-shR-LOC10928219 LOC10928219 shRNA Amp
pSilencer-shR-ADAMTS9-AS1 ADAMTS9-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0001862 circ0001862 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0058514 circ0058514 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-5193 miR-5193 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-4635 miR-4635 shRNA Amp
pcDNA3.1-ADAMDEC1 ADAMDEC1 Amp
pcDNA3.1-ASIC2 ASIC2 Amp
pcDNA3.1-Myc-B27(C-tag) B27 Amp
pcDNA3.1-BLK BLK Amp
pcDNA3.1-Braf Braf Amp
pcDNA3.1-HA-CD58 CD58 Amp
pcDNA3.1-CLIC4 CLIC4 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD134 CD134 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD274 CD274 Amp
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文献和实验荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
放大，因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1）20×SSC：175.3g NaCl，88.2g柠檬酸钠，加水至1000mL（用10mol/L NaOH调pH 至7.0）。2）去离子甲酰胺（DF）：将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min，用Whatman l号滤纸滤。3）体积分数70％甲酰胺/2×SSC：35mL甲酰胺，5mL 20×SSC，10mL水。4）体积分数50％甲酰胺/2×SSC：100mL甲酰胺，20mL 20×SSC，80mL水。5）体积
）。 4．杂交后漂洗 （1）2×SSC液内振动移除盖片。 （2）2×SSc 55℃10min×2。 （3）0.5×SSc 55℃5min×2。 （4）缓冲液II（含0.5%封阻 试剂 ，用缓冲液I溶解）37℃30min。 （5）缓冲液I（10mmol/l Tris �HCl, 15.0mmol/L NaCl pH7.5）15min，室温。 （6）酶标地高辛抗体（1：5000，应用缓冲液I稀释）37℃
大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式，即探针为液相，被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液（杂交液）中并需要一定的温度，可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买，不同的杂交液配方相差较大，杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方：PEG 6000 10%；SDS 0.5%；6×SSC；50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1．预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min，在杂交瓶中加入杂交
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