人胞质非特异性肌肽酶(CNDP2)ELISA试剂盒

Western Blot，如何成功优化？

992)样本：人 HeLa 细胞 (Fig.6)A. 5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 mg/mL，溶于 5% 脱脂奶粉和 0.15 M NaClB. 5% 脱脂奶粉封闭，一抗浓度：1.0 mg/mL，溶于 5% 脱脂奶粉和 0.5 M NaClFig.6我们为您推荐实验设计数据参考：裂解缓冲液蛋白定位裂解液推荐试剂盒全细胞NP-40 or RIPA全蛋白抽提试剂盒细胞质（可溶蛋白）Tris-HCl胞浆蛋白和核蛋白抽提试剂盒线粒体蛋白提取试剂盒细胞质（细胞骨架 等不溶蛋白）Tris

蛋白质翻译后修饰（PTMs)概述

饥饿的 HeLa 和 NIH 3T3 癌细胞系获得的裂解物中的磷酸化蛋白特异性。图示：从复杂生物样品中富集高纯度磷蛋白。用 theThermo Scientific Pierce 磷酸化蛋白富集试剂盒进行 Weste blot 分析，根据试剂盒说明书制备细胞裂解液，富集磷酸化蛋白。利用识别生长因子信号传导相关关键调控蛋白的磷酸化特异性抗体实现蛋白检测。细胞色素 C (pI 9.6) 和 p15Ink4b (pI 5.5) 作为非磷酸化蛋白非特异性结合的阴性对照。FT = 流穿馏分，W = 合并洗脱馏分，E

分离细胞浆和细胞核蛋白全攻略

tablet/50mlDXY网友kevinfong回复：你是不是分离细胞浆蛋白和细胞核蛋白，然后做Western发现细胞核中也有Ikb-α，或者细胞浆中也能检测到Oct-1啊？如果是或者，我觉得挺正常的，因为转录因子部分也存在于细胞浆，至于Ikb-α是不是细胞质特异性的我就不清楚了。但是，我觉得你用的是试剂盒应该没有问题的，然而也很难彻底分开，在步骤4吸取上清时小心点，不要触及沉淀，可以剩少许上清（这部分上清不收集），然后用白尖再把这些上清吸干净扔掉，这样可以尽量减少各个组分的污染。我用过试剂盒分过