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武汉华美生物工程有限公司
- 服务名称:
哺乳动物细胞表面展示技术服务
哺乳动物细胞表面展示技术服务
哺乳动物细胞展示平台与其他如噬菌体或酵母展示技术不同,是一种为优化治疗性抗体的可开发性而设计的先进平台。在培养皿中培养的哺乳动物细胞与临床试验中的人类细胞和用于抗体生产的工业化细胞有许多共同特征。这项技术是抗体工程(如亲和力成熟和人源化)的尖端工具。
哺乳动物细胞展示非常适合用于工程化抗体,主要应用于亲和力成熟。
在不同物种间交换 CDR,以满足不同的治疗需求,如人源化、犬源化等。
这种先进的技术可兼容各种抗体形式,从IgG到纳米抗体,到TCR等。
华美生物提供:
近似人源蛋白的翻译后修饰
精准的生物物理特性
优异的开发潜力
抗体工程设计的最好选择
哺乳动物细胞展示质量控制
| 蛋白质量控制 | |||
|---|---|---|---|
| 高尔基体 | 内质网 | 膜 | |
| 噬菌体 | ✖ | ✖ | ✖ |
| 酵母 | ✔ | ✔ | ✖ |
| 哺乳动物 | ✔ | ✔ | ✔ |
哺乳动物细胞展示 vs. 噬菌体展示
应用1:亲和力
● 通过突变CDR3中的一个氨基酸,客户的单克隆抗体的亲和力提高了100倍。
| Target | Analyte | Kon (1/Ms) | Koff (1/s) | KD (M) | RU2 |
|---|---|---|---|---|---|
| Confidential_1 | Ab54 (WT) | 3.76E+05 | 1.24E-02 | 3.30E-08 | 0.26 |
| Ab54-17 | 3.83E+05 | 1.06E-04 | 2.77E-10 | 0.97 |
● 客户单克隆抗体对猕猴抗原的亲和力通过在每个CDR3中突变一个氨基酸提高了100倍,同时保持了对人源抗原的亲和力。
| Target | Analyte | Kon (1/Ms) | Koff (1/s) | KD (M) | RU2 |
|---|---|---|---|---|---|
| Confidential_2 (Human) | Ab16 (WT) | 4.13E+05 | 1.85E-04 | 4.48E-10 | 3.44 |
| Ab16-03 | 4.53E+05 | 2.09E-04 | 4.61E-10 | 1.79 | |
| Confidential_2 (Cynomolgus) | Ab16 (WT) | 1.81E+05 | 5.24E-03 | 2.90E-08 | 1.87 |
| Ab16-03 | 8.92E+05 | 4.47E-04 | 5.01E-10 | 4.32 |
● 客户的体内实验数据进一步证明了工程变体的良好质量。
更多亲和力成熟
应用2:人源化
● 客户的单克隆抗体通过一个专门设计用于筛选高亲和力分子的库进行了人源化处理,并且人源化抗体的亲和力比亲本分子高出10倍。
| Target | Analyte | Kon (1/Ms) | Koff (1/s) | KD (M) | RU2 |
|---|---|---|---|---|---|
| Confidential_3 | Ab01 (WT) | 4.06E+04 | 3.11E-05 | 7.66E-10 | 0.45 |
| Ab01-01 | 2.17E+04 | 7.06E-06 | 3.25E-10 | 1.11 | |
| Ab01-02 | 7.22E+04 | 7.49E-06 | 1.04E-10 | 0.14 | |
| Ab01-03 | 5.61E+04 | 4.78E-05 | 8.52E-10 | 2.76 | |
| Ab01-04 | 2.79E+04 | 2.38E-06 | 8.53E-11 | 2.59 | |
| Ab01-05 | 4.89E+04 | 4.25E-05 | 8.69E-10 | 3.73 |
● 野生型和工程化分子也通过酶联免疫吸附试验(ELISA)和流式细胞术(FC)进行了比较。
应用3:治疗性抗体优化
● 通过亲和力成熟提高了客户抗体对小分子(化合物)的阻断活性。
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文献和实验,从申请临床到获批临床历时 14 个月。 斑马鱼血管生成基因如血管内皮细胞生长因子(VEGF)、an-iopoietins、ephrions 及相应受体与哺乳动物功能相似,而且斑马鱼血管系统及其对调节血管新生类药物的治疗反应与哺乳动物类似。另外斑马鱼胚胎在血液循环系统严重缺陷的情况下仍能存活,且胚胎透明,利用血管转基因荧光斑马鱼可以在 24 小时以内就定量评价药物的血管形成抑制作用。 与传统的鸡胚尿囊膜、小鼠角膜实验相比,斑马鱼更加便捷、快速、高效,而且结果定量分析的准确度更高
如今,单克隆抗体市场炙手可热。一方面,由于巨大的应用价值,单克隆抗体需求强劲。另一方面,单克隆抗体制备工艺复杂、周期长。为此,能否快速制备出高质量的单克隆抗体已成为影响抗体研究应用的关键。46天制备出高质量的单克隆抗体在几年前在京天成生物技术(北京)有限公司得以实现,从而使之在全球制备高质量单克隆抗体服务竞争中占极大优势。 单克隆抗体具有理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制等特点。正是这些优点使它一问世就受到高度重视,并广泛应用于生物
。而苯氧类化合物被确定会造成相似的缺陷,一种铜转运 ATP 酶 atp7a 功能被破坏的斑马鱼突变体。此相似的表型充分说明了其相关性,事实上,外源铜可以拯救 kalihinol F - 诱导的斑马鱼发育缺陷疾病,而 kalihinol F 能够抢救铜中毒的斑马鱼胚胎和哺乳动物细胞。 应当指出的是,这种通过多维表型匹配来确定机制的方法还可以用于那些起初不是由斑马鱼发现的化合物上。就像烟曲霉素,一种抗血管生成的自然产物,被发现已经超过 60 年,而它的靶点蛋氨酸
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