βARK1 Inhibitor

本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！

产品名称	βARK1 Inhibitor	产品货号	CS-01Y75644
规格	1mg 5mg 10mg 25mg	CAS号	24269-96-3
含量	>95.00%	分子式	C12H9NO6
分子量	263.2	用途	仅供科研研究使用

化学性质:    

      
βARK1 Inhibitor规格：1mg 5mg 10mg 25mg
CAS：24269-96-3
别名：N/A
化学名：N/A
分子式：C12H9NO6

分子量：263.2
溶解度：DMF: 30 mg/mL,DMSO: 30 mg/mL,DMSO:PBS (pH 7.2)   (1:2): 0.3 mg/mL,Ethanol: slightly soluble
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the   ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or   blue ice upon request
产品描述: 

 
βARK1 inhibitor is an inhibitor of G protein-coupled receptor kinase 2/β-adrenergic receptor kinase 1 (GRK2/βARK1; IC50 = 126 μM). It is selective for GRK2/βARK1 over PKA at concentrations up to 1 mM. βARK1 inhibitor decreases systolic blood pressure in ob/ob and nicotinamide plus streptozotocin-induced mouse models of type 2 diabetes when administered at a dose of 200 μg/kg. It also improves clonidine-induced relaxation of precontracted isolated aortic rings and improves glucose tolerance in the ob/ob mouse model. βARK1 inhibitor inhibits dopamine inhibition reversal (DIR) induced by serotonin or neurotensin in the rat ventral tegmental area in vitro.
使用方法: 

 
1. 常用筛选浓度
　　注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
　　一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
　　注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
　　注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品: 

 

Fmoc-3,4-dehydro-Pro-OH	PF-00562271
VEGFR-2-IN-6	血管内皮细胞生长因子(VEGF)检测试剂盒
GW 583340 dihydrochloride	血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)试剂盒elisa
PF-04217903 methanesulfonate	肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配4(TRAIL-R4)检测试剂盒
Trovafloxacin	可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配(sTRAIL)检测试剂盒elisa
SR-3029	肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配3(TRAIL-R3)试剂盒ELISA
Uridine	肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配1(TRAIL-R1)ELISA检测试剂盒
Metformin D6 hydrochloride	Intestinal trefoil factor,ITF ELISA Kit
Nucleoside-Analog-1	血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA检测试剂盒
GNE-477	血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)试剂盒ELISA
BIP-135	血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)检测试剂盒
PF-05212384 (PKI-587)	血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)检测试剂盒elisa
Umbralisib R-enantiomer	βARK1 Inhibitor血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)试剂盒elisa
Indoximod (NLG-8189)	血管内皮细胞生长因子受1(VEGFR-1/Flt1)检测试剂盒
粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)检测试剂盒	血管内皮细胞生长因子受3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA检测试剂盒

蛋白酶抑制剂混合物实验步骤: 

 
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)