- ￥750
- Solarbio
- R1210
- 北京
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
Column extraction of Bacterial (G -) RNA kit
- CAS号：
详询
- 保质期：
1 year
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- 保存条件：
室温（15℃-25℃）干燥保存
- 规格：
50T
产品简介：
该试剂盒对经典的异硫氰酸胍抽提 RNA 的方法进行了改良。改良后的裂解液能迅速裂解细胞，
释放出 RNA 的同时灭活 RNase。RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜上，再通
过一系列漂洗和离心等步骤进一步将蛋白等杂质去除，最后用 RNase-Free ddH2O 将 RNA 从硅基质
膜上洗脱。本试剂盒操作快速便捷，安全无需使用酚、氯仿等有毒试剂，操作安全。
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文献和实验得到蛋白质图谱[1]： 图 1：从小鼠脾脏和肝脏中使用不同方法提取总蛋白的蛋白图谱 条带 1 为柱式法提取的蛋白样品，条带 2 为 RIPA 可溶组分（RIPA 裂解后的上清），条带 3 为 RIPA 不可溶性组分（丢弃的沉淀部分）。实验发现 RIPA 的不可溶组分蛋白质图谱与可溶性组分图谱相似，但是不完全相同。 丢弃的不可溶组分中仍然可检测到许多蛋白条带，覆盖了整个蛋白质图谱分子量范围，不同样品的不可溶组分图谱也各不相同。丢失的蛋白会引起蛋白图谱发生变化，改变不同种类蛋白的比例，且具有
，不同的裂解液配方溶解效率不同，通常使用的 NP-40、RIPA 等裂解液无法将所有蛋白全部溶出（如图 2），已经有研究发现细胞骨架、细胞外基质蛋白及部分膜蛋白、核蛋白等属于难溶蛋白，在提取过程中会形成不可溶沉淀[3]。如果目的蛋白属于这类难溶蛋白，仅使用可溶性组分（上清）用于 WB 实验时，目的蛋白将无法被检测到。针对这种情况，我们可以选择更加有效的裂解液配方，或者使用柱式蛋白提取法来增溶目的蛋白。例如，使用柱式法总蛋白提取法，可有效溶解难溶蛋白，避免不可溶组分的产生，有效解决蛋白丢失问题
在 RIPA 不可溶组分中，如果样品又是研磨困难的组织样品，则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上（内质网，高尔基体，溶酶体，线粒体，内体等）表达，且蛋白表达量较低，若用总蛋白检测时条带较弱，则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测，提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程，推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离，将样品分离为不同组分如分成细胞核，细胞浆，细胞
