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EPI400超级感受态细胞

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  • ¥366 - 1496
  • 碧云天(beyotime)
  • D1037S
  • 国产
  • 2025年07月16日
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    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海经科化学科技有限公司

    • 保存条件

      -80 ℃

    • 规格

      10×100μl/50×100μl

    规格:10×100μl产品价格:¥366.0
    规格:50×100μl产品价格:¥1496.0

    产品简介:
    碧云天生产的EPI400超级感受态细胞,英文名EPI400 Super Competent Cells,是一种可以用于各种不稳定DNA或毒性基因克隆的E. coli EPI400即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达5×107cfu/μg DNA以上。

    EPI400菌株无诱导剂培养条件下质粒DNA的拷贝数量维持在极低的水平,但在诱导培养条件下可启动质粒的快速扩繁,短期获得高产量的质粒DNA,保证了稳定性差的质粒的完整性。

    EPI400菌株来源于EC100菌株,将EC100核基因中可以提高质粒拷贝数的pcnB基因删除后插入一个诱导型启动子驱动的pcnB基因,从而构建成EPI100菌株[1]。非诱导情况下,EPI400菌株中的质粒拷贝数低,在加入WDEPI-诱导剂I后可以提高质粒拷贝数到正常状态。

    EPI400菌株的基因型为F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL (StrR) nupG trfA tonA pcnB4 dhfr。其中[mcrA, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]基因使EPI400菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA;recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取;lacZΔM15标记的存在使EPI400可用于蓝白斑筛选;tonA赋予其抗噬菌体T1和T5的能力;rpsL赋予其链霉素抗性。

    保存条件:

    -80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。

    注意事项:

    感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。

    感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。

    待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。

    感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。

    感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。

    通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。

    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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    图标文献和实验
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      The Inoue Method for Preparation and Transformation of Competent E. coli: "Ultra Competent" Cells Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne

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