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现货
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一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
-80 ℃
- 规格:
10×100μl/50×100μl
| 规格: | 10×100μl | 产品价格: | ¥388.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50×100μl | 产品价格: | ¥1588.0 |
产品简介:
碧云天生产的C43(DE3)PLysS超级感受态细胞,英文名C43(DE3)PLysS Super Competent Cells,是一种可以用于高效表达毒性蛋白或疏水性蛋白的E. coli C43(DE3)PLysS即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达1×108cfu/μg DNA以上。
C43(DE3)PlysS可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,从而用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达。
该菌株起源于BL21(DE3),pLysS质粒的引入使其不仅具有氯霉素抗性,并可同时表达T7溶菌酶。T7溶菌酶可以与T7 RNA聚合酶结合抑制其转录活性,在降低重组蛋白的基础表达水平的同时不干扰IPTG介导的诱导性表达[1]。因而C43(DE3)PLysS菌株具有更强的表达毒性蛋白和疏水性蛋白的能力。
C43(DE3)PLysS菌株的基因型为F– ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)pLysS CamR。
保存条件:
-80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
注意事项:
感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验【交流】转载:JM109,DH5a,BL21这些感受态有何区别
子的表达载体(如pET系列)的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT, hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3) 3:BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-
) 3:BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS,因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型:F-,ompT hsdS(rBB-mB-),gal, dcm(DE3,pLysS ,Camr 4:JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
抽提。 其实不仅仅是表达,建库克隆都会涉及菌株的不同要求,推荐看看以下文章:克隆/建库/表达专用超级高效感受态细胞 。感受态不是目的,菌株的背景才是关键。
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