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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件:
-80 ℃
- 规格:
10×100μl/50×100μl
| 规格: | 10×100μl | 产品价格: | ¥388.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 50×100μl | 产品价格: | ¥1588.0 |
产品简介:
碧云天生产的BL21 Star(DE3)超级感受态细胞,英文名BL21 Star(DE3) Super Competent Cells,是一种可以用于将异源蛋白以超高水平表达的E. coli BL21 Star(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化,转化效率可以高达1×108cfu/μg DNA以上。
E. coli细胞具有内源性的mRNA降解小体(mRNA degradosome) [1],其中包含由rne131基因编码的RNase E。BL21 Star(DE3)中rne131的基因突变,导致RNase E功能缺陷,增加了目的基因的mRNA稳定性,表现为重组蛋白的超高得率。
BL21 Star(DE3)是在BL21(DE3)的基础上改造而成,适合T7启动子驱动的重组蛋白诱导表达系统,比如常见的原核表达载体pET系列。同时含有大肠杆菌RNA聚合酶,也可用于非T7启动子表达载体(pGEX、pMAL等)的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高,所以不适合毒性蛋白的表达[2]。
BL21 Star(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm rne131 (DE3)。
保存条件:
-80℃保存,一年内有效。避免反复冻融,通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。
注意事项:
感受态细胞禁止反复冻融,并应尽可能避免冻融,反复冻融会导致转化效率大幅下降。
感受态细胞融化后,须尽快加入待转化样品,不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间,以免降低感受态细胞的转化效率。
待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%,样品体积过大会导致转化效率下降。
感受态细胞对于温度变化非常敏感,需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。
感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作,不能使用移液枪吹打混匀。
通常仅建议取部分样品用于转化,这样万一遇到转化失败的情况,还留有样品可以再次进行转化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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the cells appear to make cells more competent.Some cell strains may work better than others (DH5alpha works well in my hand).Note also that some cells (e.g.HB101)has greater recombination activity than others.This method doesn't appear to work with BL21
strains may work better than others (DH5alpha works well in my hand).Note also that some cells (e.g.HB101)has greater recombination activity than others. This method doesn't appear to work with BL21,so just grow the cells at 30 or 37 ℃
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