BL21(DE3)超级感受态细胞

产品简介：
碧云天生产的BL21(DE3)超级感受态细胞，英文名BL21(DE3) Super Competent Cells，是一种可以用于IPTG诱导下的重组蛋白表达的E. coli BL21(DE3)即用型化学感受态细胞。使用pUC19质粒进行热激活转化，转化效率可以高达1×10⁷cfu/μg DNA以上。

BL21适合T7启动子驱动的重组蛋白诱导表达系统，比如常见的原核表达载体pET系列[1]。该菌株缺失内源性蛋白酶的大肠杆菌B菌株，它能有效避免重组表达蛋白的降解，广泛用于重组蛋白的表达。BL21(DE3)是被λ噬菌体DE3溶原化所得BL21衍生菌株。噬菌体DE3中的T7 RNA聚合酶受到lacUV5启动子控制。外源添加IPTG可以诱导BL21(DE3)菌株中T7 RNA聚合酶的快速表达。T7 RNA聚合酶进而识别表达质粒载体上的的T7启动子，从而驱动重组蛋白的高效表达。

BL21(DE3)菌株的基因型为F- ompT hsdS_B(r_B^- m_B^- ) gal dcm(DE3) [2]。其中ompT可减少外膜蛋白酶的表达量，从而减少重组蛋白的水解，提高表达产量；hsd基因变异可致菌株细胞内的I型限制酶EcoK或EcoB活性缺失，从而提高PCR产物的转化效率；dcm可消除甲基化对腺嘌呤和胞嘧啶的影响，从而帮助某些外源质粒复制，比如携带易受甲基化影响的酶切位点的外源质粒。

保存条件：

-80℃保存，一年内有效。避免反复冻融，通常制备6个月后转化效率随保存时间延长而逐渐降低。

注意事项：

感受态细胞禁止反复冻融，并应尽可能避免冻融，反复冻融会导致转化效率大幅下降。

感受态细胞融化后，须尽快加入待转化样品，不宜在无转化产物的情况下放置时间超过10分钟或以上时间，以免降低感受态细胞的转化效率。

待转化样品的体积通常不宜超过感受态细胞体积的10%，样品体积过大会导致转化效率下降。

感受态细胞对于温度变化非常敏感，需要避免出现不应有的使用说明之外的温度变化。

感受态细胞对于机械力非常敏感。加入待转化样品时应轻柔操作，不能使用移液枪吹打混匀。

通常仅建议取部分样品用于转化，这样万一遇到转化失败的情况，还留有样品可以再次进行转化。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。