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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
25
- 英文名:
C22 Galactosylceramide (d18:1/22:0)
- CAS号:
74645-25-3
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1 mg
规格:1 mg
CAS:74645-25-3
别名:N/A
化学名:N/A
C22 Galactosylceramide (d18:1/22:0)分子式:C46H89NO8
分子量:784.2
溶解度:
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
| 产品名称 | C22 Galactosylceramide (d18:1/22:0) | 产品货号 | CS-01Y75790 |
| 规格 | 1 mg | CAS号 | 74645-25-3 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C46H89NO8 |
| 分子量 | 784.2 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
C22 Galactosylceramide is a sphingolipid that has been found in the central nervous system.1,2 C22 Galactosylceramide levels are increased in the spinal cord, but not the brain or liver, of mice fed a methionine-restricted diet.1 C22 Galactosylceramide has been found in postmortem hippocampus from patients with Alzheimer's disease.2 [Matreya, LLC.]1.Jové, M., Ayala, V., Ramírez-Núez, O., et al.Specific lipidome signatures in central nervous system from methionine-restricted miceJ. Proteome Res.12(6)2679-2689(2013) 2.Hejazi, L., Wong, J.W.H., Cheng, D., et al.Mass and relative elution time profiling: Two-dimensional analysis of sphingolipids in Alzheimer's disease brainsBiochem. J.438(1)165-175(2011)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| Atrial Natriuretic Factor (5-27) (human) | MEG (sulfate) |
| Megestrol | 肌酐检测试剂盒 |
| Megestrol Acetate | 肌红蛋白检测试剂盒 |
| Meglutol (Dicrotalic acid) | 肌球蛋白轻链激酶检测试剂盒 |
| MEGX (hydrochloride) | 肌球蛋白检测试剂盒 |
| MEK inhibitor | 肌酸激酶同工酶MB检测试剂盒 |
| MEK162 (ARRY-162, ARRY-438162) | 肌酸激酶同工酶MM检测试剂盒 |
| MEK-IN-1 | Rat connective tissue growth factor ELISA Kit,connective tissue growth factor,CTGF |
| Melagatran | 肌钙蛋白T检测试剂盒 |
| Melanin | 肌钙蛋白Ⅰ检测试剂盒 |
| Melanin Concentrating Hormone, salmon (MCH (salmon)) | 活化凝血因子X检测试剂盒 |
| Melanin Concentrating Hormone, salmon (TFA) | 活化蛋白C检测试剂盒 |
| Melanocyte stimulating hormone release inhibiting factor | C22 Galactosylceramide (d18:1/22:0)黄生成素释放激素检测试剂盒 |
| Octacosanoic Acid | 黄生成素检测试剂盒 |
| 缓激肽检测试剂盒 | 黄嘌呤氧化酶检测试剂盒 |
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文献和实验。 3.诱发植物多倍体的方法及原理 物理方法:温度剧变(高温、低温),机械损伤(嫁接、反复的切断产生愈伤),各种射线照射。 化学方法:秋水仙素、萘嵌戊烷、异生长素、富民农等,其中以秋水仙素效果最好。 秋水仙素是以百合科植物秋水仙(Colchicum autumnale)的种子及器官中提炼出来的生物碱。分子 式为 (C22H25NO6+1/2H2O),白色黄白色结晶,有剧毒,使用时应避免接触皮肤及溅射入口、眼。秋水仙素诱发多倍体的作用机制是抑制纺锤丝微管
。 1965.6 将Mamiya Press标准型的镜头可交换功能加入到Press S型号中。 Mamiya Flex C22 1966.3 (带105mm镜头
.‐C., Ratto, T.V., and Longo, M.L. 2006. Galactosylceramide domain microstructure: Impact of cholesterol and nucleation/growth conditions. Biophysical J. 90:4466‐4478. Castellana, E.T. and Cremer, P.S. 2006. Solid supported lipid bilayers
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