- ￥999
- 碧云天（beyotime）
- 国产
- L28850
- 2025年12月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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零下20℃
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至少一年有效
- 库存：
现货
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-NAA60-sgRNA (NAA60基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的NAA60基因敲除的质粒(L28850 pLenti-NAA60-sgRNA)、慢病毒(L28851 NAA60 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L28852 NAA60 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L28853 NAA60 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L28854 NAA60 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
NAA60基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | NAA60 | 79903 | BC011267 | NM_024845 |
| About the gene | |
| Official Symbol | NAA60 |
| Previous Symbol | NAT15 |
| Official Full Name | N(alpha)-acetyltransferase 60, NatF catalytic subunit |
| Synonyms | FLJ14154 |
| Location | 16p13.3 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q9H7X0 |
| Pathway/Library | others |
| Gene Summary | This gene encodes an enzyme that localizes to the Golgi apparatus, where it transfers an acetyl group to the N-terminus of free proteins. This enzyme acts on histones, and its activity is important for chromatin assembly and chromosome integrity. Alternative splicing and the use of alternative promoters results in multiple transcript variants. The upstream promoter is located in a differentially methylated region (DMR) and undergoes imprinting; transcript variants originating from this position are expressed from the maternal allele. |
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充：设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室，CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复，其实际上就是一种基因编辑器，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来，研究人员发现，它似乎是一种精确的万能基因武器，可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步：1. 确定待敲除基因的靶位点；2. 设计识别靶位点识别的一对
repair templates that contain homology arms flanking the site of alteration，也就是有一个供体质粒，质粒有两端同源序列（互补 DSB 用），两段同源序列之间就是我们要插入或者修改的内容。同源臂通常大于 500 bp（2）single-stranded DNA oligonucleotides (ssODNs)，emm。。。就是需要两条单链寡核苷酸（ssODN），两臂也是带有同源序列（30～60 个碱基，但为了提高效率，最好是大于
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