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上海经科化学科技有限公司
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5µg
pLenti-POC1A-sgRNA (POC1A基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因,或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性,全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除,以及通过puromycin筛选稳定细胞株;也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装,然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。

图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得,sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的POC1A基因敲除的质粒(L13460 pLenti-POC1A-sgRNA)、慢病毒(L13461 POC1A Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L13462 POC1A Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L13463 POC1A Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L13464 POC1A Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
POC1A基因的基本信息如下:
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | POC1A | 25886 | BC007417 | NM_015426 |
| About the gene | |
| Official Symbol | POC1A |
| Previous Symbol | WDR51A |
| Official Full Name | POC1 centriolar protein A |
| Synonyms | DKFZP434C245 |
| Location | 3p21.2 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q8NBT0 |
| Pathway/Library | Lung Cancer Growth Related Genes Library |
| Gene Summary | POC1 proteins contain an N-terminal WD40 domain and a C-terminal coiled coil domain and are part of centrosomes. They play an important role in basal body and cilia formation. This gene encodes one of the two POC1 proteins found in humans. Mutations in this gene result in short stature, onychodysplasia, facial dysmorphism, and hypotrichosis (SOFT) syndrome. |
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文献和实验CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充:设计 sgRNA 之后,需要对结果进行判断:但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选,我也不知道为什么,总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
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