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零下20℃
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至少一年有效
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现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
1μg/100μg
| 规格: | 1μg | 产品价格: | ¥888.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100μg | 产品价格: | ¥1169.0 |
产品简介:
pCMV-Myc-LTA是碧云天自行研发生产的用于在哺乳动物细胞中表达带有Myc标签的LTA (large T antigen) (1-708aa)融合蛋白的质粒,可以方便地使用抗Myc标签的抗体来识别LTA蛋白的表达,或进行免疫共沉淀分析等。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;带有氨苄青霉素(Ampicillin)抗性和新霉素(Neomycin)抗性,可利用其氨苄青霉素抗性转化大肠杆菌后筛选阳性菌。而在转染哺乳动物细胞后,可使用G418 (ST081/ST081)筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。G418和新霉素效果一致,但G418的细胞毒性更低。
LTA即SV40大T抗原(SV40 large T antigen),也称SV40gp6 large T antigen (Macaca mulatta polyomavirus 1),由猿猴病毒40 (Simian virus 40, SV40)表达,全长708氨基酸,分子量为81.6kDa,是一种六聚体蛋白。当LTA单独表达时能诱导静止细胞的增殖和转化,可以诱导实验动物肿瘤的形成,为研究DNA复制和细胞转化提供了非常有用的模型[1-3]。
pCMV-Myc-LTA质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 235-818 |
| Myc tag | 898-927 |
| SV40 large T antigen | 958-3081 |
| bGH poly(A) signal | 3177-3401 |
| f1 ori | 3447-3875 |
| SV40 promoter | 3889-4219 |
| Neomycin resistance gene | 4286-5080 |
| SV40 poly(A) signal | 5254-5375 |
| ori | 5826-6414 |
| Ampicillin resistance gene | 6585-7445 |
pCMV-Myc-LTA质粒(7581bp)的图谱如下:

pCMV-Myc-LTA质粒的详细图谱见说明书
pCMV-Myc-LTA中没有的酶切位点包括:
| AarI | AbsI | AccIII | Acc65I | AcvI | AfeI | AflII |
| AgeI | AjiI | AleI | Aor13HI | Aor51HI | AscI | AsiGI |
| AsiSI | Asp718I | AsuNHI | AxyI | BaeI | BanIII | BarI |
| BbrPI | BbvCI | BfrI | BlpI | BmgBI | BmtI | BoxI |
| Bpu1102I | Bsa29I | Bse21I | BseAI | BseCI | BshVI | BshTI |
| BsiWI | BsmBI | Bsp13I | Bsp1720I | BspDI | BspEI | BspOI |
| BspTI | BspXI | Bst98I | BstAFI | BstEII | BstPI | BstPAI |
| Bsu15I | Bsu36I | BsuTUI | BtrI | CciNI | CelII | Cfr42I |
| ClaI | CspAI | Eco32I | Eco47III | Eco72I | Eco81I | Eco91I |
| EcoO65I | EcoRI | EcoRV | Esp3I | FseI | FspAI | I-CeuI |
| I-PpoI | I-SceI | KflI | KpnI | Kpn2I | KspI | MauBI |
| MreI | MroI | MspCI | MssI | Nb.BbvCI | NheI | NotI |
| Nt.BbvCI | OliI | PacI | PalAI | PasI | Pfl23II | PI-PspI |
| PI-SceI | PinAI | PmaCI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI |
| Psp5II | PspCI | PspEI | PspLI | PspPPI | PsrI | RgaI |
| RigI | SacII | SanDI | SbfI | SdaI | SfaAI | SfiI |
| Sfr303I | SgfI | SgrAI | SgrBI | SgsI | SmiI | SrfI |
| Sse8387I | SstII | SwaI | Vha464I | XcmI |
pCMV-Myc-LTA中的单酶切位点包括:
| AhdI | ApaI | AvrII | BamHI | BglII | Bpu10I | BsgI |
| BssHII | BstXI | BstZ17I | DraIII | EagI | HpaI | KasI |
| MluI | MscI | NarI | NruI | PaeR7I | PciI | PflFI |
| PflMI | PluTI | PspOMI | PspXI | PvuI | RsrII | ScaI |
| SexAI | SfoI | SgrDI | SmaI | SnaBI | SpeI | StuI |
| TspMI | Tth111I | XbaI | XhoI | XmaI |
pCMV-Myc-LTA质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
CMV-F primer (769-789): 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3'
BGH-R primer (3171-3188): 5'-TAGAAGGCACAGTCGAGG-3'
pCMV-Myc-LTA的全序列信息:D3036 pCMV-Myc-LTA-全序列.txt。
在HEK293T细胞(人胚肾细胞)中共转pCMV-Myc-LTA和pCMV-3X Flag-p53和(D3031),经免疫共沉淀(Co-IP)实验验证,p53和LTA两种蛋白可以相互作用,具体参考Flag&Myc Co-IP阳性对照质粒对(D3041)。
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本质粒仅经过测序、免疫沉淀和免疫共沉淀验证,未经过功能性验证。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验【求助】克隆100个已知序列的基因于带有绿色荧光蛋白的载体中需要多少时间和经费?
个和12,000个,其中11,000个克隆的表达已经通过Western Blot的验证。这些克隆以2种形式提供:一种是在表达的蛋白C末端带Myc-DDK(即FLAG)标签,一种是带GFP标签。这些cDNA克隆均构建于pCMV6入门载体上,可方便转换至其他目的载体。 按照其网页上的促销价:900RMB/clone × 100 = 9万RMB, 直接买,不用等时间,就可搞定,批量买估计还可以讲价,关键的是品质有保证。 注:非公司托儿,因前段时间帮朋友筹划项目专门研究
pCF-T M13F M13R pCI T7(17Base) 此载体无反向引物 pCI-neo T7(17Base) T3 pCMS-EGFP T7 T3 pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7 pCMV5 pCMV5F pCMV5R pCMV5-Flag pCMV5F pCMV5R pCMV-MYC/HA pCMV-F pCMV-R pCMV-Sport M13F/T7 SP6/M13R pCMV-Tag(KAN+) T3 T7 pCR2.1-TOPO
的浓度影响给定大小的线状DNA的迁移率,因此采用不同浓度的凝胶可以分离不同大小范围的DNA片段。EB:即3,8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲锭溴盐,(Ethidium Bromide)。它能够插入DNA分子中的碱基对之间而与DNA结合。由于EB分子的插入,在紫外光的照射下,凝胶电泳中的DNA条带呈现出红色荧光,易于检测。可以检测10ng 的DNA。质粒pCMV-Myc-T10 NEB 标准分子量片段(1kb DNA Ladder)EcoR1 和Xho1 核酸内切酶(Takara)EcoR 1和Xho
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