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零下20℃
- 保质期:
至少一年有效
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
1μg/100μg
| 规格: | 1μg | 产品价格: | ¥888.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100μg | 产品价格: | ¥1169.0 |
产品简介:
pCMV-Blank是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-Blank质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| multiple cloning site | 680-753 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 796-817 |
| SV40 polyA signal | 829-1212 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 1350-1654 |
| bla promoter | 1679-1803 |
| SV40 promoter | 1823-2161 |
| neomycin/kanamycin resistance ORF | 2196-2987 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 2988-3446 |
| pUC origin | 3575-4242 |
pCMV-Blank质粒的图谱如下:

pCMV-Blank质粒的详细图谱见说明书
pCMV-Blank中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-Blank)包括:
| Afl II | Age I | Ahd I | Asc I | Bbs I | Bbv II | Blp I | |
| Bsg I | BsiW I | BsmB I | BspM II | BsrG I | BssH II | Bst1107 I | |
| BstE II | Ear I | Eco47 III | Eco72 I | EcoN I | Esp I | Fse I | |
| Nru I | PflM I | Pme I | Pml I | PpuM I | Psp1406 I | Sap I | |
| Sca I | Spl I | ||||||
pCMV-Blank中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-Blank once)包括:
| Nde I | CA`TA,TG | 241 | Pvu I | CG,AT`CG | 830 | |
| SnaB I | TAC|GTA | 347 | Bcl I | T`GATC,A | 984 | |
| Nhe I | G`CTAG,C | 598 | Mun I | C`AATT,G | 1077 | |
| Sac I | G,AGCT`C | 656 | Hpa I | GTT|AAC | 1090 | |
| Sac II | CC,GC`GG | 663 | Mlu I | A`CGCG,T | 1213 | |
| BstX I | CCAN,NNNN`NTGG | 664 | Dra III | CAC,NNN`GTG | 1443 | |
| Not I | GC`GGCC,GC | 669 | Sfi I | GGCCN,NNN`NGGCC | 2100 | |
| PspA I | C`CCGG,G | 681 | BseR I | GAGGAG 16/14 | 2143 | |
| Xma I | C`CCGG,G | 681 | Stu I | AGG|CCT | 2146 | |
| Srf I | GCCC|GGGC | 683 | Cla I | AT`CG,AT | 2165 | |
| Sma I | CCC|GGG | 683 | Kas I | G`GCGC,C | 2324 | |
| BamH I | G`GATC,C | 688 | Nar I | GG`CG,CC | 2325 | |
| Hind III | A`AGCT,T | 694 | Ehe I | GGC|GCC | 2326 | |
| Pst I | C,TGCA`G | 704 | Bbe I | G,GCGC`C | 2328 | |
| EcoR I | G`AATT,C | 706 | Msc I | TGG|CCA | 2407 | |
| EcoR V | GAT|ATC | 714 | Tth111 I | GACN`N,NGTC | 2443 | |
| Sal I | G`TCGA,C | 718 | BsrD I | GCAATG, 8 | 2558 | |
| Acc I | GT`MK,AC | 719 | Bsp1286 I | G,DGCH`C | 2628 | |
| Bgl II | A`GATC,T | 724 | Rsr II | CG`GWC,CG | 2841 | |
| PaeR7 I | C`TCGA,G | 730 | BsiC I | TT`CG,AA | 3007 | |
| Xho I | C`TCGA,G | 730 | BstB I | TT`CG,AA | 3007 | |
| Xba I | T`CTAG,A | 736 | Bsa I | GGTCTC 7/11 | 3314 | |
| Spe I | A`CTAG,T | 742 | HgiE II | ACCNNNNNNGGT-1/13 | 3654 | |
| Bsp120 I | G`GGCC,C | 748 | ApaL I | G`TGCA,C | 3929 | |
| Apa I | G,GGCC`C | 752 | ||||
pCMV-Blank质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(796-817): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-Blank的全序列信息: D2602 pCMV-Blank-seq.txt
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验birkin 我在尝试转染某种细胞,载体是购买的商业载体(pCMV6),之前转染HEK293作为预实验,已经用WB证明有效,但是换到现在这种细胞之后就很奇怪,一开始想用短期转,结果WB做不出来,觉得可能是转染率太低,于是又改做稳定转染,用了G418筛选。花了近2个月,细胞稳定下来了,取样做RT-PCR,有相当强的mRNA表达(-RT和对照组转染也做了的,基本没有带,所以不会是污染),谁知做WB还是一点东西都没有……我都快疯了,既然能抗G418,又有大量mRNA
一、Sp20D+型光电比色计:1. 打开电源开关(左侧旋钮),温机15分钟以上。2. 按Mode键使红灯显示在transmittance的位置。3. 调整归零旋钮(左侧旋钮)使显示板读值为0(T%)。4. 插入空白对照组(blank)的溶液之测光管,盖上盖子,调右侧旋钮,使显示板指针读值为100 (T%)。5. 按Mode键使红灯显示在absorbance的位置(讯号出现闪动)。6. 取出测光管倒出空白组溶液,装入待测液,再将该测光管插入,盖上盖子,此时显示板的读值即为吸光测量值。7. 注意
pCF-T M13F M13R pCI T7(17Base) 此载体无反向引物 pCI-neo T7(17Base) T3 pCMS-EGFP T7 T3 pCMV-3Tag-4A T3 /PFLAG-CMV-F T7 pCMV5 pCMV5F pCMV5R pCMV5-Flag pCMV5F pCMV5R pCMV-MYC/HA pCMV-F pCMV-R pCMV-Sport M13F/T7 SP6/M13R pCMV-Tag(KAN+) T3 T7 pCR2.1-TOPO
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