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文献和实验界面 [13] 。对于全新蛋白质的设计,这个策略能否成功取决于蛋白质结构模板设计的好坏。下面我们介绍设计结构模板需要考虑的几个因素。 2.1.1 二元组图的区域 1 ) α 螺旋设计 二元组图利用蛋白质二级结构中固有的周期性。α 螺旋具有每圈 3.6 个残基的重复周期性(图 9.1A )。要设计一节双亲性 α 螺旋二级结构片段,可以用二元图形 P-N-P-P-N-N-P ( P 表示极性残基,N 表示非极性残基 )。我们最初的 α 螺旋设计集中在四螺旋束模体上(图
PMSF Laemmli's Sample Buffer (2X): 1.0M Tris-HCl (pH 6.8) 10% SDS glycerol (37.7g) β-mercaptoethanol bromophenol blue -raise to 100ml with dH2 O 12.5ml 40ml ~30
, 40% methanol,7% acetic acid) 0.5 g Coomassie Brilliant blue R 800 ml methanol Stir until dissolved. Then add: 140 ml acetic acid ddH20 to 2 L Store at room temperature for up to 6 months. Destaining Solution I (40% methanol, 7% acetic acid
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