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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
-20°-20°
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
9014-01-1
- 规格:
P4860-50ml

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文献和实验内产物的生成量。由于酶促反应速度可随时间的推移而逐渐降低其增加值,所以,为了正确测得酶活力,就必须测定酶促反应的初速度。 碱性蛋白酶在碱性条件下,可以催化酪蛋白水解生成酪氨酸。酪氨酸为含有酚羟基的氨基酸,可与福林试剂 (磷钨酸与磷钼酸的混合物)发生福林酚反应。(福林酚反应:福林试剂 在碱性条件下极其不稳定,容易定量地被酚类化合物还原,生成钨蓝和钼蓝的混合物,而呈现出不同深浅的蓝色。)利用比色法即可测定酪氨酸的生成量,用碱性蛋白酶在单位时间内水解酪蛋白产生的酪氨酸的量来表示酶活
内。 ⑶ 1/2000碱性蛋白酶溶液: 精确称取干酶粉2克,加入pH10硼砂氢氧化钠缓冲溶液10ml,在小烧杯中溶解,并用玻璃棒搅拌,静止片刻后,将上层液小心倾入容量瓶中,残渣部分再加入少量缓冲液,如此反复搅拌溶解4次,最后全部移入200ml容量瓶中。用缓冲溶液定容至刻度,充分摇匀,用二层纱布或四层纱布过滤,吸取滤液5ml,移入100ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,所得液为稀释2000倍的酶液。 ⑷ pH10 硼砂氢氧化钠缓冲液: 甲液(0.05moL/L硼砂
) 式中:X——样品的酶活力,u/g(u/mL); A——试样溶液的平均吸光度; K——吸光常数; 8——反应试剂的总体积,mL; 2——吸取酶液2.00mL,以1min计; 1/10——反应时间10min,以1min计; n——稀释倍数 E——紫外法与福林法的换算系数(中性、碱性蛋白酶系数为0.50;酸性蛋白 酶系数为0.77)。 所得结果表示至整数。 7 结果的允许差
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