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999
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亦高生物
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9000-71-9
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C6905-250MG

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文献和实验络合成紫红色化合物。其颜色深浅与蛋白质的浓度 成正比,可以用比色法进行测定。双缩脲法最常用于需要快速但并不需要十分精确的测定。 二、 试剂 和器材 试剂 : (1) 标准蛋白溶液(5mg/ml):准确称取已定氮的酪蛋白(干酪素或牛血清白蛋白)用0.05mol/L氢氧化钠溶液配制,冰箱存放备用。 (2) 双缩脲试剂:溶解1.5g硫酸铜(CuSO 4
化解离形成细胞悬液,传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来,常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和EDTA溶液,有时也用胶原酶(collagenase)溶液。 1.胰酶溶液:胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示,常见有1:125和1:250,即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度,配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液(如前面的D-Hank"s),因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的最佳pH
1%BSA的PBS 100/uL,37℃21h,然后加上述稀释的上清100uL混匀,37℃反应1h,用0.5%酪蛋白缓冲液洗涤3次,加100uL1:1000稀释的辣根过氧化物酶标记的兔抗人C3d抗体,37℃ 45min,用0.5%酪蛋白缓冲液洗涤2次,最后用PBS洗1次,每孔加l00uL0.4mg/mL OPD底物溶液,然后加4mol/L H2S04终止反应,于酶标仪上492nm读取OD值。 4、样本中C3d的检测 选择上述反应性好,结果清楚的酶标板的抗体浓度作为工作浓度,包被酶标板,4℃24h。取
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