100× Protease Inhibitor Cockta

细胞或组织等提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，在体外环境下，提取物中的蛋白
容易发生降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加蛋白酶、磷酸酶等抑制剂
是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
100× Protease Inhibitor Cocktail MIX(细菌专用，AEBSF)是一种专门用于细菌蛋白提取的蛋白
酶抑制剂混合物。本产品可以有效抑制细菌提取物中的各种蛋白酶活性，如氨基肽酶、丝氨酸蛋白
酶、半胱氨酸蛋白酶、苏氨酸和天冬氨酸蛋白酶等。其中 AEBSF 是一种水溶性的丝氨酸蛋白酶不
可逆抑制剂，其抑制常数与 PMSF 的抑制常数相似，且毒性更低，稳定性更好。Bestatin 是氨基肽
酶可逆抑制剂。E-64 是半胱氨酸蛋白酶不可逆抑制剂。Pepstatin A 是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制剂。
可广泛应用于：WB、Co-IP、pull-down、IF、IHC、kinase assay 等。
本产品额外赠送一支 100mM EDTA，客户可根据自己的需求选择是否使用。

产品组份：
组份 成分 溶剂 规格 保存
100× Protease Inhibitor Cocktail
MIX
（细菌专用，AEBSF）
23mM AEBSF
DMSO 1*1ml -20℃
2mM Bestatin
0.3mM Pepstatin A
0.3mM E-64
100mM EDTA 100mM EDTA Water 1*1ml 2-8℃

产品优势
1. 产品成分全公开，浓度明确
2. 产品兼容性好，高效抑制多种蛋白酶，全面保护蛋白不被降解
3. 本系列所以产品均额外赠送一支 100mM EDTA，可直接使用，无需再额外准备
4. 灵活定制。客户可以根据自己的实验定制所需的 MIX 或定制单组份的专属 Kit。也可以定制规格
和包装。

使用说明（仅供参考）
1. 使用前需将本产品在室温下解冻，开盖前请低速离心一下，以便更好的将黏附于管壁的液体甩至
管底。
2. 按照 1:100 的比例将该抑制剂混合物加入到溶液样品中（如细胞裂解液或组织提取液），混匀
后即可使用。
3. 本产品可适当分装后保存，含有抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜冻存后使用。
4. 如需使用 EDTA，可按照合适的比例加入裂解液中，混匀后即可使用。

注意事项：
1. 后续实验如需检测提取液中金属蛋白酶活性，则不宜添加 EDTA。
2. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。
3. 请勿存放于普通住宅区。
4. 为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

常见问题
Q：Inhibitor Cocktail 能否不按照规定比例稀释使用?
A：我们的 Cocktail 采用经典浓度配比，为了确保对不同类型的蛋白酶都有充分的抑制效果，使用
时建议按照规定比例稀释。但是蛋白酶活性抑制效果和很多因素有关，如目标蛋白降解的难易程度、
蛋白酶的浓度、活性、抑制剂的浓度都会影响最后的保护效果。而不同来源的样本中磷酸酶含量各
不相同。故实际使用中，可根据实验结果进行适当的调整使用浓度。

Q：为什么要用抑制剂 Cocktail?和常用的 PMSF 比有啥优势?
A：Cocktail 是低毒，全面的蛋白保护试剂，可最大限度地保护蛋白，使其免于被蛋白酶降解。比单
一的抑制剂更为可靠。PMSF 是经典的丝氨酸蛋白酶抑制剂，被广泛应用于细胞裂解纯化蛋白过程，
但由于 PMSF 在很多方面存在明显的缺点其一是毒性较高，因此在蛋白酶抑制剂中选用 AEBSF 作
为其替代品。其二是易降解失效，在细胞裂解过程中很容易失效，而蛋白酶抑制剂 Cocktail 不但保
护更加全面，而且效果更加持久。

Q：DMSO 会不会对实验造成影响?
A：一般来说，DMSO 是不会影响实验效果的。DMSO 被作为很多生物活性物质的溶剂，比如蛋白
结晶和免疫共沉淀等要求较高的实验体系中 DMSO 也有应用。DMSO 在室温下性质稳定，在低温
条件下 DMSO 还是优秀的细胞冷冻保护剂。

Q：用了 Cocktail，但结果仍然不理想是为什么?
A：对于绝大多数蛋白，Cocktail 都有很好的效果。如果还是出现蛋白得率低的情况，需要谨慎检查
实验步骤和方案设计，减少导致蛋白降解的环节。例如，细胞处理前，先要将裂解体系完全准备好，
预先加入 Cocktail 并混匀，将要破碎的细胞，收集完后或从冰箱中取出后立即加入准备好的裂解液
中，尽量保证全程低温操作。若目的蛋白特殊，Cocktail 中没有特定蛋白酶家族的抑制剂，可在裂
解液中另加特定的蛋白酶抑制剂。