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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20°-20°C
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
3483-12-3
- 规格:
10197777001

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文献和实验连接酶 0.1Weiss单位 5mmol/L ATP 1μl 于16℃温育1-4小时 10xT4噬菌体DNA连接酶缓冲液 200mmol/L同Tris.Cl(pH7.6) 50mmol/K MgCl2 50mmol/L二硫苏糖醇 500μg/ml牛血清白蛋白(组分V.Sigma产品)(可用可不用) 该缓训液应分装成小份,贮存于-20℃。 另外,再设立两个对照反应,其中含有(1)只有质粒载体;(2)只有外源DNA片段。如果外源DNA量不足,每个
实验试剂 1. Ficoll(Amersham Biosciences) 2. 冰冷磷酸盐缓冲液(PBS),pH 7.4 3. 裂解缓冲液:5mol/L单巯基氰酸胍,10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),50mmol/L Tris—HCl,1mmol/L二硫苏糖醇(DTT),用0.45微孔滤膜过滤 4. 4mol/L和3mol/L氯化锂,高压灭菌 5. RNA溶解缓冲液:0.1%SDS
,包括还原剂(二硫苏糖醇和硫基乙醇等),铜离子螯合剂(EDTA,EGTA)和高浓度缓冲液,但是这些干扰作用可以通过对蛋白质样品的稀释进行消除。 二、材料与试剂 1. 牛血清白蛋白(BSA)(Sigma) 2. BCA蛋白检测试剂(Pierce) 三、仪器 1. 分光光度计(Tecan) 四、操作步骤 1. 制备BSA标准样。先配制1 ml BSA母液(2 mg/ml,溶于水中),再配制浓度在20-2000 ug/ml 的一系列(5~8)稀释液。
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