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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20°-20°C
- 保质期:
1-3年
- 库存:
999
- 供应商:
亦高生物
- CAS号:
506-26-3
- 规格:
L2378-100MG

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文献和实验将dna固定于尼龙膜上的杂交 denhardt试剂通常配制50×贮存液,过滤后保存于-20℃。可将该贮存液10倍稀释于预杂交液(常为含有0.5%sds和100μg/ml经变性被打断的鲑精dna的6×ssc或6×sspe)中。50×denhardt液中含5g聚蔗糖(ficoll,400型,pharmacia)、5g聚乙烯吡咯烷酮和5g牛血清白蛋白(组分v”sigmal),加水至终体积为500ml
与结果 2.1 色谱条件 Dogsil C 18 -45μm4.6×250mm色谱柱;检测波长280nm;柱温35℃;流动相为0.2mol.L;磷酸盐缓冲液-甲醇(90∶10);流速1ml.min。 2.2 对照品与供试品溶液的制备 精密称取CTP适量,加流动相配成0.4mg.ml的溶液;CMP、CDP、CTP混合对照溶液:精密称取CMP、CDP、CTP对照品适量,加流动相配成各100μg.ml的溶液;精密量取适量本品,加流动相稀释成0.4mg.ml的溶液。 2.3 测定
,回收水相。合DNA溶液快速通17号皮下注射针头12次,以剪切DNA。加入2倍体积用冰预冷的乙醇沉淀DNA。离心回收DNA并重溶于水,配制成10mg/ml的浓度,测定溶液的OD260值并计算出精确的DNA浓度,然后煮沸10min,分装成小份保存于-20℃。使用前置沸水浴中加热5min,然后迅速在冰浴中骤冷。预杂交液中应含有100μg/ml经变性并被打断的鲑鱼精子DNA (责任编辑:大汉昆仑王)
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