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- 文献和实验
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-20°-20°C
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1-3年
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999
- 供应商:
亦高生物
- 规格:
I5260-1ML

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文献和实验收集菌体,将菌体于-20℃冻存1小时,化冻后加1ml细菌周质腔蛋白提取液,振荡混匀,置于4℃轻摇1小时,22,000×g,4℃离心20分钟,取上清,用protein G Agarose亲和柱分离纯化嵌合抗CD20 Fab。(2) Fab对3H掺入Raji细胞的影响按1105细胞/孔接种96孔培养板,加入Fab溶液至终浓度为50g/ml,每个样品做三个平行孔,以抗CD20抗体Rituxan和HI47为阳性对照,以PBS为阴性对照,37℃,5%CO2培养24小时,每孔加入3H –UdR 0.5Ci
首先用硫酸铵或硫酸钠盐析法粗提丙种球蛋白,再进一步纯化,常用的方法有: 1.离子交换层析法:离子交换剂有DEAE纤维素和QAE纤维素。 2.凝胶过滤医学教育|网搜集整理:通过多孔凝胶介质达到分离目的。 3.亲和层析法:采用纯化抗原或粗提抗原交联的sepharose4B的层析柱来制备。 4.酶解法【如制备F(ab‘)2】:片段用胃蛋白酶水解制备。
CD20抗体Fab’片段,并在大肠杆菌中高效可溶性分泌表达[ 8 ] ,本研究的目的在于研究嵌合抗CD20Fab’片段的抗肿瘤活性及其作用机制。一、材料和方法1、材料MTT购自Sigma公司;Annexin-V为宝灵曼公司试剂盒;TRIZOL RNA提取试剂盒为美国Gibco公司产品;兔抗人bcl-2单克隆抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG为北京中山生物技术有限公司产品,嵌合抗CD20Fab’片段为我室表达并纯化。β-actin引物(上游:5-TCATGTTTGAGACCTTCAA-3,下游
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