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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
50
- 英文名:
Adrenomedullin (1-50), rat
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
500μg 1mg 5mg
| 产品名称 | Adrenomedullin (1-50), rat | 产品货号 | CS-01Y75720 |
| 规格 | 500μg 1mg 5mg | CAS号 | N/A |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C248H381N77O75S5 |
| 分子量 | 5729.5 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Adrenomedullin (1-50), rat规格:500μg 1mg 5mg
CAS:N/A
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C248H381N77O75S5
分子量:5729.5
溶解度:Soluble in DMSO
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Adrenomedullin (1-50), rat is a 50 amino acid peptide, which induces a selective arterial vasodilation via activation of CGRP1 receptor.Adrenomedullin (1-50), rat is a 50 amino acid peptide, which induces a selective arterial vasodilation via activation of CGRP1 receptor[1].Adrenomedullin (1-50), rat causes a dose-dependent and endothelium-independent vasodilation on the arterial mesenteric vasculature, and this effect is inhibited by CGRP1 receptor antagonist. Adrenomedullin (1-50), rat activates CGRP1 receptor in the double-perfused mesenteric bed of the rat[1]. Adrenomedullin (1-50) ameliorates pulmonary vascular structural remodeling of hypoxic rats with incresed plasma NO and H(2)S concentrations. Adrenomedullin (1-50) also regulates the development of hypoxic pulmonary hypertension and hypoxic pulmonary vascular structural remodeling, through promoting NO and H(2)S production in hypoxic rats[2].[1]. Berthiaume N, et al. Rat adrenomedullin induces a selective arterial vasodilation via CGRP1 receptors in the double-perfused mesenteric bed of the rat. Can J Physiol Pharmacol. 1995 Jul;73(7):1080-3. [2]. Qi JG, et al. Effect of adrenomedullin 1-50 on chronic hypoxic pulmonary hypertension in rats. Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban. 2006 Apr 18;38(2):151-4.
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| 3-O-Hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glycero-1-phosphocholine | Cyclo(-Val-Val) |
| Cycloaspeptide A | 输入蛋白13(IPO13)ELISA试剂盒 |
| Cyclobenzaprine HCl | 输入蛋白11(IPO11)ELISA试剂盒 |
| Cyclocytidine HCl | 输出蛋白7(XPO7)ELISA试剂盒 |
| Cyclodrine hydrochloride | 输卵管糖蛋白1(OVGP1)ELISA试剂盒 |
| Cyclofenil | 输出蛋白6(XPO6)ELISA试剂盒 |
| Cycloguanil | 输出蛋白5(XPO5)ELISA试剂盒 |
| Cycloguanil (hydrochloride) | 输出蛋白4(XPO4)ELISA试剂盒 |
| Cycloguanil D6 (Chlorguanide triazine D6) | 输入蛋白4(IPO4)ELISA试剂盒 |
| Cycloguanil D6 Nitrate | 输入蛋白5(IPO5)ELISA试剂盒 |
| Cyclohexaneacetic acid | 输入蛋白7(IPO7)ELISA试剂盒 |
| Cyclohexanecarboxylicacid | 输入蛋白8(IPO8)ELISA试剂盒 |
| Cyclohexanoyl Coenzyme A | Adrenomedullin (1-50), rat输入蛋白9(IPO9)ELISA试剂盒 |
| α-Terpineol | 衰变加速因子(DAF)ELISA试剂盒 |
| 人成纤维细胞生长因子9ELISA试剂盒 | 衰老关键蛋白1(FBLN1)ELISA试剂盒 |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验at 4°C for 15 minutes. 9. Remove and aliquot supernatant. We recommend making several 50 μl aliquots. 10. Before running ELISA, dilute protein 1:100 and run a Bradford total protein assay or Quant-iT™ Protein Quantitation Kit assay (Cat. no. Q
thick-walled polycarbonateμltracentrifuge tubes (Beckman # 336091)with screw caps (Beckman # 338906) •25 ml Ultraclearμltracentrifuge tubes (Beckman # 344058) Preparation of Rat Liver Cytosol 1.Chill the superspeed centrifuge,μltracentrifuge,SS-34 and 50.2Ti
Preparing Mitochondria from Rat Liver
from an experimental viewpoint to avoid using anesthetic or tranquilizing drugs. We sedate the animals using isoflurane then decapitate them using a rat guillotine. Isoflurane is short acting and has not appeared to compromise mitochondria function. The adjective
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