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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Rosetta(DE3)大肠杆菌表达菌株
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
低温保存
- 规格:
株
| 一、基本信息 |
|
| 菌株名称 |
|
| 菌株品牌 |
江蓝纯生物 |
| 基因型 |
F– ompThsdSB(rB- mB-) gal dcm (DE3)pRARE2(CamR) |
| 菌株抗性 |
Chl |
| 培养基 |
LB |
| 菌株类别 |
大肠杆菌 |
| 培养条件 |
37℃,有氧,LB |
| 菌株简介 |
Rosetta系列菌株来源于BL21系列宿主菌,该系列菌株含有原本在大肠杆菌中稀少的真核细胞密码子,增加了真核细胞的蛋白表达水平。Rosetta(DE3)菌株含有pRARE质粒,能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密码子的tRNA,该质粒具有氯霉素抗性。Rosetta(DE3)通过提供稀有密码子,使得该宿主菌相对于其他大肠杆菌,能够提供更加通用的蛋白质表达,从而提升目的蛋白表达水平。DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。 |
| 质粒转化 |
42℃热激 |
| 保存方式 |
20%甘油,-20℃ |
| 基本应用 |
用于蛋白表达 |
| 供应范围 |
仅供限于科研实验研究 |
| 运输方式 |
低温快递运输 |
| 特别说明 |
细胞购买/细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买,请立即与江蓝纯生物联系 |
| 二、售后服务 |
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| 细胞予重发 |
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。 2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。 3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。 4. 常温发货的细胞静置2小时后,干冰冻存发货的细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。 5. 常温发货的细胞静置22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染,经核实后,重发。 6. 细胞活性问题,请在收到产品3天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。 |
| 细胞不重发 |
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。 2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。 3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。 4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。 5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。 6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。 |

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文献和实验): Transformation efficiency: 0.6-1 x 109 cfu/µg pUC19 DNA(这可是BL21(DE3)系列的10(6)的效率所不能比拟的,做库的时候非常有用) T7 RNA Polymerase in the lac operon - no lambda prophage(lambda prophage虽然在细菌的基因组中,但实际上是比较不稳定的,在应激的条件下,可能破坏表达菌的基因组。) Tight control of expression by lacIq allow
【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择!(接原原核表达研究者关心的10个问题贴)
性不利,容易出现质粒丢失、表达水平不稳定、菌株退化乃至发生污染等情况。 我们建议: 1、长期存放菌株和pET重组子应该存在甘油-70℃保种。但是要注意高浓度甘油(>10%)会导致质粒不稳定。请尽量保持甘油浓度8%。(15%浓度的甘油保种液和新鲜菌液1:1就行)2、重组质粒不宜长期保存于表达菌株(带DE3的大肠杆菌)中,请尽量使用带有recA endA突变的克隆菌株(比如C600,DH5a)进行质粒抽提和保存质粒。表达型的菌株提质粒经常会有质量不高或者背景的问题。特别是大量抽提。
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