杜氏改良Eagle 培养基/营养混合物 F-12 Ham，S

类器官培养与应用——肠类器官

ng/ml) 和 EGF (终浓度100ng/ml)，用移液器吹打混匀，配制成肠基质胶。 13、将球状体滴加在预冷的肠基质胶中，并将样品混匀，总体积将达到 75μl (50μl 基质胶+ 25μl 培养基+球状体)。 14、将混合物接种在 4 孔板中，注意需接种在孔的中心，避免接触侧壁。 15、将 4 孔板放入 37℃，5%CO2 的培养箱中孵育 10min，使 Matrigel 固化。 16、向每个孔中缓慢滴加 5ml 肠道生长培养基，确保基质胶被完全覆盖。 17、每隔 4 天，或当培养基中的

肿瘤成球实验以及肿瘤球体增殖/活力检测方案

孔培养体积缩小为 384 孔和 1536 孔形式的建议体积。由于接种体积和密度可能因细胞类型和下游应用而异，因此建议针对检测方案优化条件。 方法和材料 实验可以是贴壁生长癌细胞系的肿瘤干细胞，亦可是McCoy's 5a 培养基中培养的 T-29 人结肠癌细胞、F-12K (Kaighn's Mod.) 培养基中培养的 A549 人肺癌细胞，MCF7 人乳腺癌细胞。 另外，HTB-22™ 和 DU 145 人前列腺癌细胞均在杜氏改良 Eagle 培养基 (DMEM) 中培养。所有生长培养基均含有

人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南

培养基 (SCM308) 添加到细胞培养小室顶部，并在小室下方的孔中添加 500 µL。 材料：   附录：人iPSC操作指南 人iPSC的解冻 1. 应将冷冻管放在设置维持在37 °C的水浴中快速融化细胞。在水浴中轻轻涡旋冷冻管，以确保快速解冻，但请勿浸没冷冻管的盖子。打开前用70％乙醇（793213）或等效消毒剂对冷冻管进行消毒。 2. 用5 mL无菌移液管，将冷冻保护剂 / 细胞混合物从冷冻管转移到15 mL离心管中。应注意不要对细胞造成物理损伤。 3. 在室温下，缓慢地逐滴向15 mL