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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
9999
- 规格:
100ml
产品货号:T3012
存储条件:常温保存
产品说明
本产品特有的转印配方,可使转膜在 40-60 min 内完成,同等条件下,使用本转印液,可节省一半以上的时间(相比传统的转印液)。本产品对高分子量条带转移效率高。使用前请先将凝胶在去离子水中浸泡 1-2 min。与本公司 LabPAGETM 蛋白预制胶产品配合使用,能达到更优效果。
配制方法
1000 mL 转印缓冲液 (1X):50 mL Fast Transfer Buffer(20X) + 750 mL 去离子水 + 200 mL 甲醇 ( 或乙醇 ) 。
转膜条件参考
1. LabPAGETM梯度胶,浓度4-20%,厚度 1.0 mm。
160 KD蛋白4 ug,恒流 350 mA, 40 min条带完全转移至膜,考马斯亮蓝 R250 染色凝胶后条带无目视可见残留。
2. 350 mA恒流,为推荐电流使用条件,请依据凝胶浓度、厚度及所需转移蛋白之分子量大小合理设定转印时间。
对于 LabPAGETM 4-20% 梯度胶(1mm厚度), 160 KD 以下 40 min、160-180 KD 40-60 min、180 KD以上60 min以上。
注意事项
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
2.使用时请充分搅拌,使转印液混匀。
3.请依据实际情况合理设定转印时间,40 min 以上转印请适当冰浴。
4.本产品仅限科研使用。
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文献和实验使用 3~5 次。 转移缓冲液 1X 电转液: 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 溶解后 4 ℃ 保存,1 次溶液可重复使用 3~5 次。 TBS 缓冲液 加蒸馏水溶解,冰醋酸调 pH 至 7.2,定容至 1000 mL。室温保存。 洗脱液 TBST 溶液 TBS 溶液 1000 mL ,1 mL 吐温 20,混匀后即可使用,最好现用现配。 封闭液(含 5% 脱脂奶粉的 TBST 缓冲液) 溶解后使用,一次性使用。 RIPA(中)裂解液 Tris-base、NaCl、EDTA、SDS
没有SDS? zhanghai123 还有1g SDS aileen83 我做western的转膜缓冲液:Tris:3g, Glycine:14.4g,methanol: 200ml. 共1000ml 不知道是否能对你有用 haodanzhang 配制转膜液时,甲醇不宜过早加入。个人认为不用加SDS,因为加入SDS后会有气泡产生。转膜条件我的一般是:300mA, 2h,效果
80 V)要低于分离胶电泳电压(建议 110-150 V),以达到更好的浓缩效果,使样品进入分离胶时被压缩在同一水平线上。电泳直至溴酚蓝染料前沿下至凝胶末端处停止电泳,电泳时间约 2-3 小时。 电转(湿转法) 1) 电泳结束后取出凝胶,在电泳缓冲液中(冷藏的)漂洗数秒。按“三明治”模式,打开电转印夹,每侧垫上一块专用的转膜液浸泡透的海绵垫,再各放一块转膜液浸透的蛋白转移垫(定性滤纸),将凝胶平放在阴极侧滤纸上,最后将转膜液浸透并事先用甲醇浸泡的 PVDF 膜平放在凝胶上,去除气泡,夹好电
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