- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y64912
- 国产
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Fumonisin B1
- CAS号：
116355-83-0
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
1mg 5mg 10mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
Fumonisin B1 is a mycotoxin produced from F. moniliforme, a prevalent fungus of corn and other grains. Outbreaks of food poisoning in livestock and humans following the consumption of Fusarium infested corn are caused by fumonisins.[1] It functions as an inhibitor of ceramide synthase (sphingosine N-acyltransferase).[2] Fumonisin B1 attenuates the response of P388D1 cells to PAF and LPS by inhibiting ceramide formation.[3] It also blocks the apoptotic response of HaCaT cells to the antiproliferative drug hexadecylphosphocholine, again through inhibition of ceramide production.[4] Incubation of Swiss 3T3 cells with fumonisin B1 results in both an altered cell morphology due to disruption of axonal growth and a decrease in cell proliferation.[5]Reference:[1]. Gelderblom, W.C.A., Jaskiewicz, K., Marasas, W.F.O., et al. Fumonisins - novel mycotoxins with cancer-promoting activity produced by Fusarium moniliforme. Applied and Environmental Microbiology 54, 1806-1811 (1988).[2]. Wang, E., Norred, W.P., Bacon, C.W., et al. Inhibition of sphingolipid biosynthesis by fumonisins. Implications for diseases associated with Fusarium moniliforme. J. Biol. Chem. 266(22), 14486-14490 (1991).[3]. Balsinde, J., Balboa, M.A., and Dennis, E.A. Inflammatory activation of arachidonic acid signaling in murine P388D1 macrophages via sphingomyelin synthesis. The Journal of Biological Chemisty 272, 20373-20377 (1997).[4]. Wieder, T., Orfanos, C.E., and Geilen, C.C. Induction of ceramide-mediated apoptosis by the anticancer phospholipid analog, hexadecylphosphocholine. The Journal of Biological Chemisty 273, 11025-11031 (1998).[5]. Meivar-Levy, I., Sbanay, H., Bershadsky, A.D., et al. The role of sphingolipids in the maintenance of fibroblast morphology. The inhibition of protrusional activity, cell spreading, and cytokinesis induced by fumonisin B1 can be reversed by ganglioside GM3. The Journal of Biological Chemisty 272, 1558-1564 (1997).
化学性质:
规格：1mg 5mg 10mg
CAS：116355-83-0
别名：FB1
化学名：2-[2-[19-amino-6-(3,4-dicarboxybutanoyloxy)-11,16,18-trihydroxy-5,9-dimethylicosan-7-yl]oxy-2-oxoethyl]butanedioic acid
分子式：C34H59NO15
分子量：721.83
溶解度：10mg/mL in methanol & acetonitrile
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Fumonisin B1实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 产品名称 | Fumonisin B1 | 产品货号 | CS-01Y64912 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg | CAS号 | 116355-83-0 |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C34H59NO15 |
| 分子量 | 721.83 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Fumonisin B1 is a mycotoxin produced from F. moniliforme, a prevalent fungus of corn and other grains. Outbreaks of food poisoning in livestock and humans following the consumption of Fusarium infested corn are caused by fumonisins.[1] It functions as an inhibitor of ceramide synthase (sphingosine N-acyltransferase).[2] Fumonisin B1 attenuates the response of P388D1 cells to PAF and LPS by inhibiting ceramide formation.[3] It also blocks the apoptotic response of HaCaT cells to the antiproliferative drug hexadecylphosphocholine, again through inhibition of ceramide production.[4] Incubation of Swiss 3T3 cells with fumonisin B1 results in both an altered cell morphology due to disruption of axonal growth and a decrease in cell proliferation.[5]Reference:[1]. Gelderblom, W.C.A., Jaskiewicz, K., Marasas, W.F.O., et al. Fumonisins - novel mycotoxins with cancer-promoting activity produced by Fusarium moniliforme. Applied and Environmental Microbiology 54, 1806-1811 (1988).[2]. Wang, E., Norred, W.P., Bacon, C.W., et al. Inhibition of sphingolipid biosynthesis by fumonisins. Implications for diseases associated with Fusarium moniliforme. J. Biol. Chem. 266(22), 14486-14490 (1991).[3]. Balsinde, J., Balboa, M.A., and Dennis, E.A. Inflammatory activation of arachidonic acid signaling in murine P388D1 macrophages via sphingomyelin synthesis. The Journal of Biological Chemisty 272, 20373-20377 (1997).[4]. Wieder, T., Orfanos, C.E., and Geilen, C.C. Induction of ceramide-mediated apoptosis by the anticancer phospholipid analog, hexadecylphosphocholine. The Journal of Biological Chemisty 273, 11025-11031 (1998).[5]. Meivar-Levy, I., Sbanay, H., Bershadsky, A.D., et al. The role of sphingolipids in the maintenance of fibroblast morphology. The inhibition of protrusional activity, cell spreading, and cytokinesis induced by fumonisin B1 can be reversed by ganglioside GM3. The Journal of Biological Chemisty 272, 1558-1564 (1997).
化学性质:
规格：1mg 5mg 10mg
CAS：116355-83-0
别名：FB1
化学名：2-[2-[19-amino-6-(3,4-dicarboxybutanoyloxy)-11,16,18-trihydroxy-5,9-dimethylicosan-7-yl]oxy-2-oxoethyl]butanedioic acid
分子式：C34H59NO15
分子量：721.83
溶解度：10mg/mL in methanol & acetonitrile
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Fumonisin B1实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
B是 Backcross，即回交之意，而 B1 则为表示回交第一代的记号。
B1 细胞 B1细胞为CD5+B细胞，所介导的免疫应答特点为：不发生体细胞突变，无亲和力成熟，仅产生低亲和力的IgM抗体，不产生记忆细胞。 1．产生天然IgM 天然IgM是预成抗体的主要成分，主要由D1细胞分泌。这种抗体是多反应性的，能与许多病原体相关糖类抗原结合。如前所述，天然抗体可以看作是一种模式识别分子，产生机制尚未完全阐明，估计和机体在个体发育中遭受过病原体感染有关。天然抗体能保护机体防御细菌(如肺炎链球菌)感染
【进展|热点】Nature Review Immunology: 掀起B1细胞的「红盖头」
揭开B1细胞的神秘面纱——深入了解B1细胞 文章出处：The double life of a B-1 cell: self-reactivity selects for protective effector functions. Nat Rev Immunol. 2011. 11:34-46 主要内容： 不像对于T细胞我们研究和认识得较多，对于B细胞我们研究和认识得都较少。B细胞主要可以分为B1细胞和B2细胞，B1细胞根据是否表达CD5又可以进一步分为B1-a细胞
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
Fumonisin B1
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