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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
31
- 英文名:
Azadirachtin
- CAS号:
11141-17-6
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1 mg 5 mg 10 mg
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断!
化学性质:
Azadirachtin规格:1 mg 5 mg 10 mg
CAS:11141-17-6
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C35H44O16
分子量:720.7
溶解度:Chloroform: Slightly Soluble,Methanol: Slightly Soluble
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Azadirachtin is a naturally-occurring insecticide originally isolated from the seeds of A. indica.1 It inhibits feeding behavior, molting, and/or ovarian development in a species-dependent manner in insects.2 Azadirachtin inhibits feeding on G. barbadense leaves and cotyledon disks by third instar H. zea larvae with protection concentrations (PC95s) of 6.2 and 6.8 μg/disk, respectively.3 It inhibits ecdysis and growth of H. zea, H. virescens, S. frugiperda, and P. gossypiella with ecdysis inhibition values (EI95s) ranging from 1 to 10 ppm and ED50 values ranging from 0.4 to 0.7 ppm. Azadirachtin inhibits the growth of freshly molted fourth instar E. varivestis larva (LC50 = 1.66 ppm).2 It is lethal to A. stephensi first, second, third, and fourth instar larva, pupa, and adults at a concentration of 0.1 ppm.41.Butterworth, J.H., and Morgan, E.D.Isolation of a substance that suppresses feeding in locustsChem. Commun. (Lond.)123-24(1968) 2.Rembold, H.Azadirachtins. Their structure and mode of actionInsecticides of Plant Origin150-163(1989) 3.Kubo, I., and Kocke, J.A.Azadirachtin, insect ecdysis inhibitorAgr. Biol. Chem.46(7)1951-1953(1982) 4.Nathan, S.S., Kalaivani, K., and Murugan, K.Effects of neem limonoids on the malaria vector Anopheles stephensi Liston (Diptera: Culicidae)Acta. Trop.96(1)47-55(2005)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
| 产品名称 | Azadirachtin | 产品货号 | CS-01Y65238 |
| 规格 | 1 mg 5 mg 10 mg | CAS号 | 11141-17-6 |
| 含量 | >95.00% | 分子式 | C35H44O16 |
| 分子量 | 720.7 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Azadirachtin规格:1 mg 5 mg 10 mg
CAS:11141-17-6
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C35H44O16
分子量:720.7
溶解度:Chloroform: Slightly Soluble,Methanol: Slightly Soluble
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
Azadirachtin is a naturally-occurring insecticide originally isolated from the seeds of A. indica.1 It inhibits feeding behavior, molting, and/or ovarian development in a species-dependent manner in insects.2 Azadirachtin inhibits feeding on G. barbadense leaves and cotyledon disks by third instar H. zea larvae with protection concentrations (PC95s) of 6.2 and 6.8 μg/disk, respectively.3 It inhibits ecdysis and growth of H. zea, H. virescens, S. frugiperda, and P. gossypiella with ecdysis inhibition values (EI95s) ranging from 1 to 10 ppm and ED50 values ranging from 0.4 to 0.7 ppm. Azadirachtin inhibits the growth of freshly molted fourth instar E. varivestis larva (LC50 = 1.66 ppm).2 It is lethal to A. stephensi first, second, third, and fourth instar larva, pupa, and adults at a concentration of 0.1 ppm.41.Butterworth, J.H., and Morgan, E.D.Isolation of a substance that suppresses feeding in locustsChem. Commun. (Lond.)123-24(1968) 2.Rembold, H.Azadirachtins. Their structure and mode of actionInsecticides of Plant Origin150-163(1989) 3.Kubo, I., and Kocke, J.A.Azadirachtin, insect ecdysis inhibitorAgr. Biol. Chem.46(7)1951-1953(1982) 4.Nathan, S.S., Kalaivani, K., and Murugan, K.Effects of neem limonoids on the malaria vector Anopheles stephensi Liston (Diptera: Culicidae)Acta. Trop.96(1)47-55(2005)
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| H-Cys(Acm)-2-Chlorotrityl Resin | CAY10677 |
| UNC0379 trifluoroacetate (UNC-0379 trifluoroacetate) | 人庚型肝炎(HGV)抗(IgG)检测试剂盒elisa |
| Reticuline | 人高香草酸(HVA)ELISA试剂盒 |
| M-110 | 人高糖基化人绒毛膜促性腺激素(hCG)ELISA检测试剂盒 |
| CX-6258 hydrochloride hydrate | 人高危型乳头状瘤衣壳蛋白L1(HR-HPVL1)抗(IgG)试剂盒ELISA |
| BMS 986094 | 人高密度脂蛋白3(HDL3)ELISA试剂盒 |
| FNDR-20123 | 人高密度脂蛋白2(HDL2)试剂盒ELISA |
| TC-A 2317 hydrochloride | 人高密度脂蛋白1(HDL1)检测试剂盒elisa |
| IWP 12 | 人庚型肝炎(HGV)抗原试剂盒ELISA |
| BB-F-Yne | 人庚型肝炎抗(IgM)ELISA试剂盒 |
| MC1568 | 人弓蛔虫(Tc)抗(IgG)ELISA检测试剂盒 |
| EPZ011989 trifluoroacetate (EPZ-011989 trifluoroacetate) | 人钩端螺旋IgG(Leptospira)试剂盒ELISA |
| VX-680 (MK-0457,Tozasertib) | Azadirachtin人谷氨酸[NMDA]受亚基ε-2(NR-2)ELISA试剂盒 |
| Vaborbactam | 人谷氨酸[NMDA]受亚基ε-2(NR-2)抗检测试剂盒elisa |
| 人肿瘤坏死因子可溶性受ⅠELISA试剂盒 | 人谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(GCLM)试剂盒ELISA |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验相关实验
commercial Experience with Neem Products
containing azadirachtin address these concerns. The insect-growth regulator (IGR), azadtrachtin, affects over 300 species of Insects, including such important pests as armyworms, leafminers, aphids, whiteflies, psyllids, and numerous other insect pests
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Azadirachtin
¥600 - 3200









