- ￥600 - 3200
- 上海莼试
- CS-01Y63991
- 国产
- 2025年11月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
37
- 英文名：
Calcium D-Panthotenate
- CAS号：
137-08-6
- 供应商：
上海莼试
- 保存条件：
Store at -20°C
- 规格：
25g 100g
本产品仅供科学实验研究使用! 不能用于临床或动物诊断！
产品描述:
Target: N/AIC50: N/ACalcium D-Panthotenate, also named vitamin B5 Calcium, is a water-soluble vitamin for many animals [1, 2]. Pantothenic acid participates in a number of intermediary metabolic reactions as a component of coenzyme A (CoA). It has been reported that pantothenic acid exhibits radioprotective and antioxidative effects and pantothenic acid has the potential to protect against cell damage produced by reactive oxygen species [3].In vitro: Pantothenic acid (1 mM) increased biosynthesis of glutathione by boosting cell energetic in Jurkat cells [3]. In addition, pantothenic acid (1 mM) protected against oxidative damage and apoptosis in Ehrlich ascites tumour cells [4].In vivo: Pantothenic acid (200 mg/kg, intraperitoneal injections) completely blocked valproic acid-induced neural tube defects and the decreases in c-Myb and Pim-1 protein expression in CD-1 mice [1]. Moreover, Calcium D-pantothenate (3.39-10.54 mg/kg, diets) increased the intestinal enzymes activities and docosahexaenoic acid (DHA) levels [2].References:1. Dawson JE, Raymond AM, Winn LM. Folic acid and pantothenic acid protection against valproic acid-induced neural tube defects in CD-1 mice. Toxicol Appl Pharmacol. 2006;211(2):124-32.2. Qian Y, Li XF, Zhang DD, Cai DS, Tian HY, Liu WB. Effects of dietary pantothenic acid on growth, intestinal function, anti-oxidative status and fatty acids synthesis of juvenile blunt snout bream Megalobrama amblycephala. PLoS One. 2015;10(3):e0119518.3. Slyshenkov VS, Dymkowska D, Wojtczak L. Pantothenic acid and pantothenol increase biosynthesis of glutathione by boosting cell energetics. FEBS Lett. 2004;569(1-3):169-72.4. Wojtczak L, Slyshenkov VS. Protection by pantothenic acid against apoptosis and cell damage by oxygen free radicals--the role of glutathione. Biofactors. 2003;17(1-4):61-73.
化学性质:
规格：25g 100g
CAS：137-08-6
别名：
化学名：
分子式：C18H32CaN2O10
分子量：476.53
溶解度：Soluble in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Calcium D-Panthotenate实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| 产品名称 | Calcium D-Panthotenate | 产品货号 | CS-01Y63991 |
| 规格 | 25g 100g | CAS号 | 137-08-6 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C18H32CaN2O10 |
| 分子量 | 476.53 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Target: N/AIC50: N/ACalcium D-Panthotenate, also named vitamin B5 Calcium, is a water-soluble vitamin for many animals [1, 2]. Pantothenic acid participates in a number of intermediary metabolic reactions as a component of coenzyme A (CoA). It has been reported that pantothenic acid exhibits radioprotective and antioxidative effects and pantothenic acid has the potential to protect against cell damage produced by reactive oxygen species [3].In vitro: Pantothenic acid (1 mM) increased biosynthesis of glutathione by boosting cell energetic in Jurkat cells [3]. In addition, pantothenic acid (1 mM) protected against oxidative damage and apoptosis in Ehrlich ascites tumour cells [4].In vivo: Pantothenic acid (200 mg/kg, intraperitoneal injections) completely blocked valproic acid-induced neural tube defects and the decreases in c-Myb and Pim-1 protein expression in CD-1 mice [1]. Moreover, Calcium D-pantothenate (3.39-10.54 mg/kg, diets) increased the intestinal enzymes activities and docosahexaenoic acid (DHA) levels [2].References:1. Dawson JE, Raymond AM, Winn LM. Folic acid and pantothenic acid protection against valproic acid-induced neural tube defects in CD-1 mice. Toxicol Appl Pharmacol. 2006;211(2):124-32.2. Qian Y, Li XF, Zhang DD, Cai DS, Tian HY, Liu WB. Effects of dietary pantothenic acid on growth, intestinal function, anti-oxidative status and fatty acids synthesis of juvenile blunt snout bream Megalobrama amblycephala. PLoS One. 2015;10(3):e0119518.3. Slyshenkov VS, Dymkowska D, Wojtczak L. Pantothenic acid and pantothenol increase biosynthesis of glutathione by boosting cell energetics. FEBS Lett. 2004;569(1-3):169-72.4. Wojtczak L, Slyshenkov VS. Protection by pantothenic acid against apoptosis and cell damage by oxygen free radicals--the role of glutathione. Biofactors. 2003;17(1-4):61-73.
化学性质:
规格：25g 100g
CAS：137-08-6
别名：
化学名：
分子式：C18H32CaN2O10
分子量：476.53
溶解度：Soluble in DMSO
储存条件：Store at -20°C
General tips：For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。
一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1) 第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2) 根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Calcium D-Panthotenate实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
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| Ginsenoside Ro | 人鞭毛蛋白(flagellin)ELISA试剂盒 |
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| Lubiprostone | Calcium D-Panthotenate人钙网蛋白(CRT)试剂盒elisa |
| Imidazolidinyl urea | 人纤调蛋白(FMOD)elisa试剂盒 |
| 人细胞因子信号转导抑制因子1ELISA试剂盒 | 人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA检测试剂盒 |
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文献和实验相关实验
指DNA双链的局部，由具有互补性单链 DNA与之结合所产生的环状结构。当 DNA复制开始，在原来的双链中仅一方被新合成的短 DNA单链被置换的情况下可以见到（为 Displacement loop之简称）。可通过人工使 DNA单链结合来制成此结构。由 RNA单链所产生的类似结构称为 R环。
of each component.2D gel electrophoresis is generally used as a component of proteomics and is the step used for the isolation of proteins for further characterisation by mass spectroscopy. In the lab this technique is used for 2 main purposes, firstly for the large
of each component. 2D gel electrophoresis is generally used as a component of proteomics and is the step used for the isolation of proteins for further characterisation by mass spectroscopy. In the lab this technique is used for 2 main purposes, firstly
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Calcium D-Panthotenate
￥600 - 3200
