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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
32
- 英文名:
Imidaprilate (6366A)
- CAS号:
89371-44-8
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
250mg 500mg
| 产品名称 | Imidaprilate (6366A) | 产品货号 | CS-01Y64526 |
| 规格 | 250mg 500mg | CAS号 | 89371-44-8 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C18H23N3O6 |
| 分子量 | 377.39 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
Imidaprilate is an active metabolite of TA-6366, acts as a potent angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor, with an IC50 of 2.6 nM, and is used in the research of hypertensive disease.Imidaprilate (6366A) is an active metabolite of 6366, acts as a potent angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor, with an IC50 of 2.6 nM. Imidaprilate augments the bradykinin-induced contraction of guinea pig ileum, with AC50 of 1.7 nM[1].Imidaprilate (≥0.2 mg/kg) inhibits angiotensin I (AT-I)-induced pressor response. TA-6366 lowers the blood pressure in two-kidney one-clip renal hypertensive rats at 0.5-2 mg/kg via oral administration, and in spontaneously hypertensive rats (SHRs) at 2 to 10 mg/kg[1].[1]. Kubo M, et al. Pharmacological studies on (4S)-1-methyl-3-[(2S)-2-[N-((1S)-1-ethoxycarbonyl-3-phenylpropyl)amino] propionyl]-2-oxo-imidazolidine-4-carboxylic acid hydrochloride (TA-6366), a new ACE inhibitor: I. ACE inhibitory and anti-hypertensive activities. Jpn J Pharmacol. 1990 Jun;53(2):201-10.
化学性质:
规格:250mg 500mg
CAS:89371-44-8
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C18H23N3O6
分子量:377.39
溶解度:Soluble in DMSO
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)Imidaprilate (6366A)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
公司正在出售的产品:
| Boc-Valinol | (+)-δ-Cadinene |
| 4-Hydroxybenzyl cyanide | 牛端粒酶ELISA试剂盒 |
| Ganoderic acid B | 牛β-防御素ELISA试剂盒 |
| Ethinyl Estradiol | 牛长链脂酰CoA脱氢酶ELISA试剂盒 |
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| Ezetimibe Hydroxy Glucuronide | 牛纤维蛋白原ELISA试剂盒 |
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文献和实验) V2(较小均方的自由度) V1(较大均方的自由度) 1 2 3 4 5 6 7 8 12 24 ∞ 1 161.4 199.5 215.7 224.6 230.2 234.0 236.8 238.9 243.9 249.1 254.3 4052 4999.5 5403 5625 5764 5859 5928 5982 6106 6235 6366 2 18.51 19.00 19.16 19.25 19.30 19.33 19.35 19.37 19.41 19.45 19.50
n�2 n'2 (较大均方的自由度) n�2 22 24 26 28 30 35 40 45 50 60 80 100 200 500 ∞ 1 6220 6234 6240 6250 6258 6280 6286 6300 6302 6310 6334 6330 6352 6361 6366 1 2 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 99.5 2 3 26.6 26.6 26
500 ∞ 1 6220 6234 6240 6250 6258 6280 6286 6300 6302 6310 6334 6330 6352 6361 6366 1 2 99.5 99.5 99.5 99.5
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