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文献和实验-purified goat anti-mouse IgG (Jackson Labs; 1 mg/ml stock used at 1:300 dilution) Texas Red-conjugated affinity-purified donkey anti-rabbit (Jackson Labs;1 mg/ml stock used at 1:200 dilution)
at 1:200 dilution) Cy3-conjugated affinity-purified goat anti-mouse IgG (Jackson Labs; 1 mg/ml stock used at 1:300 dilution) Texas Red-conjugated affinity-purified donkey anti-rabbit (Jackson Labs;1 mg/ml stock used at 1:200 dilution)
对照。 二、注意事项 1、荧光染色后一般在 1h 内完成观察,或于 4℃ 保存 4h ,时间过长,可能会使荧光提前衰退。 2、每次试验均需设置以下三种对照: (1) 阳性对照:阳性血清+荧光标记物; (2)阴性对照:阴性血清+荧光标记物; (3)荧光标记物对照:PBS +荧光标记物。 三、免疫荧光双标的经验之谈 1、选取一抗时,要求来源于两种不同的动物,我用的是来源于家兔和大鼠的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是 donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti
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