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文献和实验,但若明确其中主要试剂的作用,所提取的质粒DNA 的纯度及质量会更高。笔者通过不同的试剂进行摸索,现将结果报告如下。1 材料和方法1. 1 材料1. 1. 1 实验菌株 使用菌株为大肠杆菌DH5α,菌株内含质粒pB I121,该质粒上克隆一h IL212基因。1. 1. 2 主要试剂 氨苄青霉素、RNaseA购自华美生物工程公司; DL15000、DL2000核酸分子量标记购自TAKARA公司;其它各种常规化学试剂均为分析纯。1. 2 方法1. 2. 1 质粒DNA的提取[ 1 ] 采用4种不同
Purification of dnEBNA-1/Soft from E. coli BL21 LysS
Inoculate 2ml of 5ml o/n culture of either p3133 (empty vector pET11a)or p3134 (dnEBNA-1/Soft)in E.coli BL21 LysS per 0.5L LB ampicillin (grow two 0.5L cultures of each) Incubate ~2hrs 37℃250rpm until OD600 = 0.4-0.6 Induce with 5ml 100mM ITPG
Purification of dnEBNA-1/Soft from E. coli BL21 LysS
Inoculate 2ml of 5ml o/n culture of either p3133 (empty vector pET11a)or p3134 (dnEBNA-1/Soft)in E.coli BL21 LysS per 0.5L LB+ ampicillin (grow two 0.5L cultures of each) Incubate ~2hrs 37℃250rpm until OD600 = 0.4-0.6 Induce with 5ml 100mM ITPG
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