Millipore-超滤管Amicon Ultra-15 3

14kd 蛋白wb的有关问题

liteng1117 求助: 构建好了重组腺病毒进行蛋白表达，分子量是14kd，5%的浓缩胶70v，12%，或15%的分离胶110v，跑90min。湿转：100v，90min。封闭用5%的脱脂奶粉，封闭3h（因为背景深，以为封闭久会好些）。一抗1:3000，4度过夜，二抗1:5000，孵育1h，洗膜都是用TBST漂洗15min ×4次。但是显影后背景特别深，虽然可以看见目的条带，但还是有一些非特异性的条带出现，不知道是封闭出问题还是一抗浓度过高。

IASYS-binding cuvette and getting KD

of ligands to the carboxymethylated dextran coated cuvette (1) Dissolve 0.2 g N-Hydroxysuccinimide (NHS)in 15 ml of deionized H2O to get 0.0133 g/ml (0.116 mol/L)concentration and aliquot into 250 µl volume and store in a -20 ℃ freezer. (2) Dissolve 1.15 g

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

的位置就停止电泳了，这时候marker已经分开一些了。7、接上一条，marker分开了一些，但是实话说分的并不好，你如果想同时测好几个蛋白指标是很困难的，不好切胶，也不好敷条带，所以我的建议，小分子蛋白就单独出来跑吧。8、电泳完成后，开始电转，电转过程我试过90V恒压60分钟，也试过250ma恒流15分钟，对于我的蛋白都能得到满意结果。9、转膜后条带是否必须戊二醛固定？经过我的尝试，对于我的11KD蛋白来说固定不固定没有影响，那么即使固定了，戊二醛也不会影响后续的抗原抗体反应。所以各位同学们固定