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- 文献和实验
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- 供应商:
西宝生物400-021-8158
- 规格:
30块
分离胶、浓缩胶预制溶液、TEMED 4℃避光保存,Ammonium persulfate配制成 10%溶液后,分装成 200 μl/管,置-20℃保存,通常 1 年内有效。
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文献和实验1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起
迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 Q:配胶缓冲液系统对电泳的影响? A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩
泳吧。4、在我用SDS-PAGE胶进行电泳过程中,一直以来都是按照说明书配制压缩胶和分离胶的,并且在说明书中,以配置2块胶为例,分离胶说明书中是让配置10ml,压缩胶是3ml。我一直以为是对应关系,在这次大悟之后我发现分离和压缩完全不是一对一对应关系,人家只是给了你配置这么多体积胶的配方而已,虽然在一个纵列上,但是绝不是对应关系(我确实才觉悟,高手轻鄙视哈)。5、接上一条经验,所以我在配胶过程中,下层分离胶配制了10ml,但是实际上每块玻板里面只加了大概3.5ml吧,也就是整个玻板高度的60-70%的样子。然后压缩
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