Recombinant Human Heme Oxygena

商品属性：

货号	XG-DB2202	种属	Human
宿主	E.Coli	表达区间	1-288
分子量	31.6 kDa	标签	N-terminal His Tag
规格	50μg、200ug、1mg	用途	仅供科研实验

商品介绍：

别称：32 kD, bK286B10, D8Wsu38e, Heat shock protein, heat shock protein 32 kD, heat shock protein 32kD, Heme oxygenase (decycling) 1, Heme oxygenase 1, Hemox, Hmox, HMOX 1, Hmox1, HMOX1_HUMAN, HO, HO 1, HO-1, HO1, Hsp32  纯度 Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses 应用  Western Blot, ELISA 性状  Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4 溶解方法Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex 存储 -20°C for 12 months as lyophilized; 2-8°C for 1 month under sterile conditions after reconstitution

表达、纯化、复性和定量，具体步骤如下：
一、重组蛋白质的诱导表达
1. 挑取转化有质粒的单菌落， 接种于 3ml 选择性 LB 液体培养基中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养过夜。
2. 次日将培养过夜的菌液 500 μl 再接种于 10ml（1:20）选择性 LB 液体培养基 中， 37 oC，250 rpm/min 振摇培养至光密度（OD600=0.6）时，取 1 ml 样本作 为诱导前标本， 10000g 离心 1min 收集菌体沉淀，－20 oC 冻存备用。
3. 加入 1 mol/L IPTG 于菌液中，使 IPTG 终浓度为 1 mM ，37 oC ，250 rpm/min 振摇培养 4 ～ 5 小时。取 1 ml 样本作为诱导后标本，同上法收集菌体沉淀， -20 oC 冻存备用。
4. 将诱导前后菌体沉淀用 20 ~ 40 μl PBS（pH= 8.0）重悬， 加入等体积的 2×SDS 上样缓冲液， 煮沸加热 5min，SDS 凝胶（SDS-PAGE）电泳分离 ， 考马斯亮蓝染色 3 小时后，脱色观察结果。
5. 选取诱导成功的细菌克隆，扩大诱导规模，收集菌体沉淀，于－ 20 oC 保存，准备做下一步分析及纯化。

二、重组蛋白质的分离纯化
重组蛋白质的可溶性鉴定
1. 将按上法诱导培养后收集的菌体重悬于裂解液 1 (Lysis buffer under native conditions )中，然后在－80 oC 低温冰箱中放置 10 min。
2. 冰中解冻。
3. 在冰浴上用超声破碎仪破菌 6 次， 每次 10 sec，间歇 10 sec，电压 200-300 V。
4. 10000g，4oC，离心 20min，取上清（为溶液 A）， － 20 oC 保存； 另将沉淀用 同样裂解液 1 溶解（为溶液 B），同样 －20 oC 保存，供后继分析使用。
5. 将上述 A、B 溶液和诱导前后的细菌进行 SDS-PAGE 电泳， 考马斯亮蓝染色， 比较分析重组蛋白质的溶解性。如果诱导表达的蛋白质位于 A 溶液中， 则为
可溶性蛋白；如果是在 B 溶液中，则为非可溶蛋白。
重组蛋白质为非可溶性蛋白（ 变性条件下）的分离纯化
1. 将菌体沉淀溶于适量裂解液 2（Lysis buffer under denaturing conditions ）中，室温下搅拌和吹打沉淀，避免泡沫生成。
2. 10000g ，4 oC，离心 30 min，收集上清液。
3. 将 Ni-NTAAgarose 充填柱子，并连接于 Pharmarcia 低压液相层析系统，用 5 倍柱体积的裂解液 2 平衡 Ni-NTAAgarose，调节 A280 值至零线。
4. 将适量上清液上样到 Ni-NTAAgarose 柱子中， 并用 lysis buffer 冲洗至 A280 值低于 0.01。
5. 分别用 5 ～ 10 倍柱体积的清洗液 1 和清洗液 2（Washbuffer 1 and 2）清洗柱 子，直至 A280 值低于 0.01。
6. 用洗脱液（Elution buffer）洗脱重组蛋白质， 在 A280 值监测下，收集出现峰 线后含有重组蛋白的所有洗脱液。
公司正在出售的产品：
Sabouraud Dextrose Agar incubation media Sabouraud Dextrose Agar  FAS重组人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 标签) Protein
大孢绿僵菌=金龟子绿僵菌大孢变种 氧化已醇产醋酸 支/瓶  上皮性钙黏附蛋白(CDHE)重组蛋白 Recombinant Cadherin, Epithelial (CDHE)
TryptoseSoyaAgar  CTF1重组人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白 Protein
MUG培养基 100g 用于大肠杆菌测定  GFRA1 Protein Human 重组人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 (His 标签)
固体培养基250g用于细菌、纤维分解菌、真菌计数培养  NA Protein H1N1 重组甲型流感 H1N1 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)
Sabouraud Dextrose Broth incubation media Sabouraud Dextrose Broth  ESAM重组人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein
醋酸菌 支/瓶  上皮细胞粘附分子(EPCAM)重组蛋白 Recombinant Epithelial Cell Adhesion Molecule (EPCAM)
PH6.8PhosphateBufferedSaline  IL5重组人 IL5 / Interleukin 5 蛋白 Protein
抗生素检定培养基7号(05药典) 250g 用于头孢噻肟等的效价测定  GFRA2 Protein Human 重组人 GFRA2 / GFRα2 / GDNFRB 蛋白 (His 标签)
气单胞菌培养基添加剂5支每支添加剂加入气单胞菌培养基基础  NA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性)
SABOURUD 2% dextrose agar沙氏 2%右旋糖琼脂 1.07315.0500 MERCK默克 incubation media SABOURUD 2% dextrose agar沙氏 2%右旋糖琼脂 1.07315.0500 MERCK默克  ICAM2重组人 ICAM-2 / CD102 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
哥伦比亚琼脂培养基 250g 灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血，用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)  生长激素(GH)重组蛋白 Recombinant Growth Hormone (GH)
液体硫乙醇酸盐培养基300ml/袋*药品，生物制品无菌试验，用于需氧菌、厌氧菌的培养  MUC1重组人 Mucin-1 / MUC-1 蛋白 (Fc 标签) Protein
营养琼脂(水质监测) 250g 用于铜绿假单胞菌化培养  GFRA3 Protein Human 重组人 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白 (His & Fc 标签)
SelectiveMedium  HA Protein Influenza 重组甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Nlands/1/00) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
SABOURUD 2% dextrose broth 沙氏 2%右旋糖肉汤 1.08339.0500 MERCK默克 incubation media SABOURUD 2% dextrose broth 沙氏 2%右旋糖肉汤 1.08339.0500 MERCK默克  DPP4重组人 DPP4 / DPPIV / CD26 蛋白 Protein
Recombinant Human Heme Oxygenase 1血平板(成品培养基) 20个/盒 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验  趋化因子C-X-C-基元配体16(CXCL16)重组蛋白 Recombinant Chemokine C-X-C-Motif Ligand 16 (CXCL16)
硫乙醇酸盐流体培养基300ml/袋*药品，生物制品无菌试验，用于需氧菌、厌氧菌的培养  CGA重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 (Fc 标签) Protein
脑-心浸萃液态培养基 250g 用于粪链球菌的增菌培养  GFRA3 Protein Human 重组人 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白 (His 标签)
布氏菌选择性培养基250g用于布氏菌的选择性分离培养  HA Protein Influenza B 重组乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签)
重组蛋白的制备涉及多个步骤，包括基因克隆、表达系统选择和蛋白纯化：
● 基因克隆：基因克隆是将目标基因导入表达载体中的过程。研究人员可以选择不同的克隆方法，如限制性酶切克隆、PCR扩增克隆等，根据需要构建目标基因的DNA序列。
● 表达系统选择：选择适合的表达系统是重组蛋白制备的关键一步。常用的表达系统包括大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞。每种表达系统都具有不同的优缺点，适用于不同类型的蛋白质表达。
5大蛋白表达系统：

​​​​​​​